海洋真菌抗癌新結構化合物1386-A作為肺癌AKT分子靶向藥的體外研究.pdf

1、目的：通過體外培養(yǎng)觀察海洋真菌抗癌新結構化合物1386-A對肺癌A549細胞增殖和凋亡的影響并探討其作用機制。 方法：MTT法測定不同濃度1386-A干預不同時間后對A549細胞增殖的影響，并計算其不同作用時點的IC50；電子顯微鏡觀察1386-A干預前后A549形態(tài)學的改變；流式細胞儀檢測分析1386-A干預前后A549細胞凋亡和細胞周期的變化情況；基因芯片技術和real time RT—PCR檢測1386-A干預后變化具統(tǒng)計

2、學意義的microRNAs: Western blot檢測1386-A干預后A549細胞中P13K/AKT信號通路相關蛋白表達水平變化情況。 結果：1386-A濃度大于10μM時對A549細胞增殖有明顯的抑制作用，其24小時、48小時和72小時的IC50分別為20.20、14.36和9.42μM，且該抑制作用呈濃度依賴性和時間依賴性；A549細胞在1386-A干預后，電鏡可觀察到典型的凋亡形態(tài)，流式細胞儀檢測到1386-A干預后

3、A549細胞GO/G1期比例升高、S期和G2/M期比例下降以及凋亡率增加，且其變化趨勢呈濃度依賴性和時間依賴性；在1386-A干預后，基因芯片和real time RT—PCR檢測到A549細胞有兩種microRNAs，即microRNA—638和microRNA—923表達上調，其平均信號強度較干預前均增高2倍以上；Western blot檢測到隨干預時間延長，p110α、p—Akt蛋白活性逐漸下降，p27蛋白活性有所增強。