人外周血單個核細胞向心肌細胞分化的體外研究.pdf

1、背景:一般認為,成熟心肌細胞屬于終末分化細胞,不具備再復制分化的能力.因此心肌細胞壞死后只能被纖維組織修復,產(chǎn)生心室重構(gòu)、心功能衰竭.如果讓梗死的心肌長出新的心肌細胞,那么在心梗的治療方面將產(chǎn)生革命性的進展.國內(nèi)外研究證實胚胎干細胞和骨髓干細胞都能在體外誘導分化為有功能的心肌細胞,同時也有很多文章都相繼報導了關(guān)于骨髓成體干細胞移植治療心梗的動物實驗,結(jié)果顯示這些細胞能遷移至梗死灶,并參與形成有功能的心肌組織.但是外周血單個核細胞定向分化

2、的體外實驗研究未見相關(guān)報道.因此,我們假設(shè)體外直接培養(yǎng)外周血單個核細胞,經(jīng)過5-氮雜胞苷誘導也能夠向心肌細胞方向分化.目的:該研究從人外周血中分離出單個核細胞,直接體外培養(yǎng)并應(yīng)用5-氮雜胞苷誘導其分化.旨在探討外周血中的單個核細胞經(jīng)過培養(yǎng)誘導后是否具有心肌細胞的特征,同時又具有干細胞的特征;試圖說明誘導后的單個核細胞能夠向心肌細胞方向分化.結(jié)論:在實驗中我們觀察到,培養(yǎng)所得貼壁細胞從在大體形態(tài)方面來看,大多呈紡錘形,部分成球狀或者桿狀外

3、形,與文獻報道骨髓干細胞向心肌細胞分化過程中的細胞形態(tài)類似.從免疫細胞化學染色結(jié)果來看,這些細胞表達肌球蛋白、α-肌節(jié)肌動蛋白、結(jié)蛋白和肌鈣蛋白T這些構(gòu)成心肌細胞骨架的主要蛋白.從RT-PCR結(jié)果來看,這些細胞也已經(jīng)有心肌細胞α-MHC和β-MHC的基因表達.從流式細胞計數(shù)分析結(jié)果來看,經(jīng)5-氮雜胞苷誘導分化后的單個核細胞CD34陽性或AC133陽性率為53.04±5.60﹪;肌動蛋白陽性率為42.70±11.73﹪.這些培養(yǎng)誘導后的單