盅口屬和冠環(huán)屬線蟲的分類及親緣關系分析.pdf

1、感染馬屬動物的寄生線蟲不僅數量巨大，而且種類繁多。尤其是圓線亞科(Strongylinae)與盅口亞科(Cyathostominae)圓線蟲嚴重危害馬屬動物的健康，給畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)帶來困擾和損失。雖然驅蟲藥能夠防治圓線蟲病，但這種手段已經導致盅口亞科線蟲產生抗藥性，使患病率增加，改變了宿主體內的寄生蟲種群結構。所以，提出新型的綜合性控制方法顯得尤為重要。然而，關于馬屬動物寄生線蟲的基礎生物學和系統發(fā)育學方面的知識十分有限，主要是因為依據

2、形態(tài)學鑒定種類和診斷有一定的局限性。本研究采用經典分類與分子分類相結合的方法對盅口亞科盅口屬（Cyathostomum）和冠環(huán)屬（Coronocyclus）線蟲的分類和系統發(fā)育關系進行分析，首次描述了3種冠環(huán)屬線蟲的掃描電鏡結構，然后測定和分析兩個屬的ITS序列和部分cox1(pcox1)序列，并探討和分析了他們的親緣關系和分類地位。
　　通過對采自河南省驢腸道的3種冠環(huán)屬線蟲:冠狀冠環(huán)線蟲（Coronocycluscoronat

3、us）、大唇片冠環(huán)線蟲（C.labiatus）、小唇片冠環(huán)線蟲（C.labratus）進行掃描電鏡的觀察，結果表明3種冠環(huán)線蟲的體表形態(tài)特征差異明顯，主要表現在外葉冠數目、亞中乳突起始部位、雄蟲生殖錐背唇上附屬物、雌蟲尾部等方面。研究結果與之前學者們在光鏡下觀察的結果基本一致，相比之下，掃描電鏡觀察到的外部形態(tài)更清楚、更準確，提供了更多更具體的結構特征。本研究將冠環(huán)屬線蟲與盅口屬的掃描電鏡結構特征進行了比較，為兩個屬的分類提供更詳細的形

4、態(tài)學資料。
　　運用聚合酶鏈式反應(PCR)技術對3種盅口屬線蟲:四刺盅口線蟲（Cyathostomumtetracanthum）、蝶狀盅口線蟲（C.pateratum）、碗形盅口線蟲（C.catinatum）和3種冠環(huán)屬線蟲的rDNA-ITS序列進行測定和比對分析。結果顯示:ITS（包括5.8S）序列長748-843bp，其中冠狀冠環(huán)線蟲的ITS2序列比其它種缺失約90bp，6個種的5.8S序列完全一致。ITS1+ITS2總變異

5、位點154個（包括gap），簡約信息位點64個。ITS1和ITS2的G+C含量分別為47.0％-48.6％和37.7％-41.1％。ITS2序列的差異性（0-31.9％）大于ITS1序列(0-4.9％)，ITS1和ITS2序列種間差異(1.1％-4.9％，1.2％-31.9％)明顯大于種內差異(0-1.9％，0-0.9％)。而且，四刺盅口線蟲與蝶狀盅口線蟲和碗形盅口線蟲的差異性，大于四刺盅口線蟲與3種冠環(huán)線蟲之間的差異性。研究獲得的盅口

6、屬和冠環(huán)屬線蟲的部分cox1序列均為393bp，無插入和缺失，A+T含量(65.9％-68.9％)明顯高于G+C含量（31.1％-34.1％），顯示出AT堿基偏倚性。通過比對pcox1序列發(fā)現，種間差異（6.6％-15.8％）大于種內差異(0.5％-2.5％)。以長傘杯冠線蟲（Cylicostephanus longiburs）為外群，基于ITS1+ITS2序列和pcox1序列分別構建NJ和MP發(fā)育樹，得到的拓撲結構基本相似。內群分為兩