熒光定量pcr技術簡要_第1頁
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文檔簡介

1、熒光定量PCR的化學原理,,水解探針的MIX,SYBR染料的MIX,SYBR染料,結合于雙鏈核酸的小溝處與雙鏈DNA結合后受激產(chǎn)生熒光在變性條件下雙鏈分開，熒光消失背景強，非特異性較強,SYBR染料法的擴增曲線,Taqman探針類,水解探針-Roche cobas與ABI Taqman,Scorpions®,,,,,雜交探針檢測－羅氏專利性技術,熒光定量PCR儀的光學原理,熒光染料的光學性質,ABI 7500 Re

2、al-Time PCR Systems 光學原件,熒光定量PCR的數(shù)據(jù)分析,標準曲線法 2 -△△Ct法,相對定量,標準曲線法,LogX0與循環(huán)數(shù)呈線性關系，通過已知起始拷貝數(shù)的標準品可作出標準曲線，根據(jù)未知樣品Ct值，就可以在標準曲線上計算出未知樣品初始模板量。,優(yōu)點：無需作標準曲線 實用適合于配對樣本的相對定量分析,2 -△△Ct法,實例,舉例-BCR/ABL1融合基因定量檢測,AB

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