電針足三里對(duì)小鼠Ⅳ型超敏反應(yīng)防治效應(yīng)及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　越來越多的研究表明，電針療法有抗過敏和抗炎作用，但對(duì)于遲發(fā)性超敏反應(yīng)（DTH）的作用機(jī)制不明。本研究旨在通過觀察電針對(duì)小鼠DTH治療效果，試探討電針足三里防治Th1介導(dǎo)的DTH的效應(yīng)機(jī)制。
　　方法：
　　使用雌性C57BL/6小鼠，共32只，體重約為18-20g，將小鼠通過編號(hào)查詢隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為對(duì)照組8只、模型組(OVA-DTH組)8只、電針治療組（DTH+EA組）8只、假電針組（DTH+Sham組）

2、8只共4組。測量小鼠足墊厚度，使用蘇木精和伊紅（HE）染色觀察足墊炎性細(xì)胞浸潤情況；酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測血清 OVA特異性抗體 IgG和IgE水平，并檢測足墊組織勻漿上清炎癥細(xì)胞因子（IFN-γ，TNF-α，IL-4和IL-5）水平；流式細(xì)胞儀檢測各組脾臟CD4+IFN-γ+T細(xì)胞和CD4+IL-4+T細(xì)胞數(shù)；蛋白質(zhì)印跡法檢測脾臟分離純化的T細(xì)胞T-bet與GATA-3蛋白表達(dá)，并比較各組間的差異。
　　結(jié)果：

3、r>　　通過組織形態(tài)學(xué)觀察，與模型組相比，電針治療組能明顯減小 OVA導(dǎo)致的小鼠足墊厚度（P<0.05），假電針組與模型組相比無明顯差異（P＞0.05）;電針治療組小鼠足墊組織真皮層炎性細(xì)胞浸潤與聚集水平明顯低于模型組（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；與模型組比較，電針治療組可顯著減輕OVA導(dǎo)致的小鼠足墊表皮層腫脹（P<0.05）。
　　通過酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測，與模型組相比，電針治

4、療組可顯著抑制血清OVA特異性抗體IgG水平和IgE水平（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；與模型組比較，電針治療組小鼠足墊組織 Th1類細(xì)胞因子水平（如 IFN-γ和 TNF-α）顯著降低（IFN-γ：P<0.05，TNF-α：P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；對(duì)比模型組，電針治療組和假電針組小鼠足墊組織 Th2類細(xì)胞因子（IL-4，IL-5）水平無顯著差異（P>0.05）。

5、
　　通過流式細(xì)胞學(xué)的檢測，與對(duì)照組比較，模型組中脾 CD4+IFN-γ+T細(xì)胞明顯增加（P>0.05），同時(shí)與對(duì)照組、模型組相比，電針治療組脾CD4+IFN-γ+T細(xì)胞數(shù)量明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；而對(duì)比對(duì)照組、模型組和電針治療組三組間脾CD4+IL-4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)水平無明顯差異（P>0.05）；依據(jù)脾CD4+IFN-γ+T細(xì)胞和脾CD4+IL-4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)的

6、變化水平，與對(duì)照組、模型組相比，電針治療組的 DTH小鼠脾 Th1/Th2細(xì)胞比率（即脾CD4+IFN-γ+T細(xì)胞數(shù)/脾CD4+IL-4+T細(xì)胞數(shù)）降至正常值附近，且與模型組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　通過蛋白質(zhì)印跡法（Westen blot）檢測，與對(duì)照組比較，模型組T-bet蛋白活性增強(qiáng)，而電針治療組T-bet蛋白活性減弱，對(duì)GATA-3則無顯著影響（P>0.05）；通過T-bet/GATA-3比率的統(tǒng)計(jì)分