褪黑素對大鼠急性脊髓損傷后自噬的影響.pdf

1、研究背景及目的
　　作為脊柱損傷最嚴重的并發(fā)癥,急性脊髓損傷(acute spinal cord injury,ASCI)常引起軀體感覺與功能障礙的嚴重損害。對患者本人而言，其帶來了嚴重的身體和心理傷害，對整個社會而言，其造成了巨大的經濟負擔。鑒于此，當今醫(yī)學界對急性脊髓損傷的預防、治療和康復給予了越來越多的重視和關注。隨著病理生理學的發(fā)展，對于急性脊髓損傷的認識也逐漸加深，將其分為原發(fā)性和繼發(fā)性脊髓損傷。由于目前臨床無法干預原發(fā)

2、性脊髓損傷，繼發(fā)性脊髓損傷在ASCI中起著重要的作用，而神經細胞的凋亡與繼發(fā)性脊髓損傷的發(fā)生密切相關。因此抑制神經元細胞的凋亡成為ASCI早期治療的關鍵。細胞自噬是一種高度保守的生物自我保護機制，可以使變性的蛋白及喪失功能的細胞器降解并重新利用。近年來，研究證實細胞自噬與凋亡有著相互影響。
　　褪黑素（MT）是由松果腺產生和分泌的兩性分子，廣泛存在于機體內，目前學者普遍認為，褪黑素通過減輕水腫、抑制凋亡、減少氧化應激等機制發(fā)揮其保

3、護神經的作用。然而，褪黑素治療脊髓損傷在抗凋亡方面的機制尚無統(tǒng)一結論。因此,在本研究中,我們通過在 ASCI動物模型中予以褪黑素干預，觀察急性脊髓損傷后自噬的發(fā)生并探討褪黑素對自噬的影響，研究褪黑素的作用機制，為臨床應用提供參考。
　　材料與方法
　　108只成年SD大鼠，按隨機數字表法隨機分為三組：假手術組(A組)、脊髓損傷組（B組）、褪黑素治療組（C組）。A組僅行椎板切除，暴露T11-T12節(jié)段，不損傷脊髓神經。B組和C

4、組用改良的Allen's法建立T11-T12脊髓損傷模型，并分別在脊髓損傷后10 min腹腔注射等體積的無水乙醇和100mg/kg的MT制劑。各組分別于術后6 h、12 h、24 h隨機選取12只大鼠，取T11-T12節(jié)段脊髓標本，6個標本檢測自噬相關蛋白的表達水平，6個標本HE染色和免疫熒光切片，觀察脊髓損傷及修復情況。術后72h對3組大鼠進行 Basso Beattie Bresnahan（BBB）運動功能評分。
　　結果

5、r>　　脊髓損傷后，B、C兩組均出現了嚴重的下肢神經功能障礙，在術后72h， C組的BBB運動功能評分較B組明顯上升(p﹤0.05)；術后各時間點大鼠脊髓的微管相關蛋白1輕鏈3（LC3）表達水平比較：C組最高、B組次之、A組最低。在6h、12 h和24 h時間點上各組之間差異均有統(tǒng)計學意義（p﹤0.05）；術后各時間點大鼠脊髓的Beclin-1表達水平比較：C組最高、B組次之、A組最低。在6h、12 h和24 h時間點上各組之間差異均有