3-羥基苯甲醛抑制兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生的研究.pdf

1、研究背景及目的：心血管疾病是最常見的疾病病種，冠心病是心血管疾病重要的組成部分，也是心血管疾病中最常見的死因。對(duì)于嚴(yán)重的冠心病，冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)是其主要的治療方法。外科手術(shù)常用的取材有兩種:左乳內(nèi)動(dòng)脈和大隱靜脈。相較于乳內(nèi)動(dòng)脈血管橋的較好的遠(yuǎn)期通暢率，大隱靜脈血管橋遠(yuǎn)期通暢率不容樂觀。3-羥基苯甲醛（3-HBA）是一種原兒茶醛的前體，有研究表明原兒茶醛類物質(zhì)有心血管保護(hù)作用。但并無3-HBA對(duì)靜脈橋作用的研究。本實(shí)驗(yàn)通過研究3-HBA

2、對(duì)人大隱靜脈血管平滑肌細(xì)胞及兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生的影響，以其尋找一種新的能夠防治冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)后靜脈橋狹窄的藥物。
　　研究方法：1.人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，設(shè)立對(duì)照組，以及藥物梯度組(25，50，100μmol/L)，作用人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，Transwell小室法檢測(cè)細(xì)胞遷移情況，流式細(xì)胞儀（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，Western Blot

3、檢測(cè)p-AKT蛋白表達(dá)情況。2.選取24只健康的實(shí)驗(yàn)用新西蘭兔，不限雌雄，體重在2000g-2500g之間，編號(hào)，計(jì)算機(jī)隨機(jī)法分成實(shí)驗(yàn)組A組和對(duì)照組B組，每組再均分為兩個(gè)亞組，即A1、A2組和B1、B2組，每個(gè)亞組6只兔子，建立同側(cè)頸外靜脈移植到頸總動(dòng)脈的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，A組動(dòng)物從耳緣靜脈注射3-HBA100mg/(kg·d)，B組動(dòng)物給予同劑量生理鹽水以作對(duì)照。給藥時(shí)間一直持續(xù)至取材前一天。A1、B1組動(dòng)物于模型建立后的第2周采集移植靜

4、脈橋，A2、B2組動(dòng)物于模型建立后4周采集移植靜脈橋，計(jì)算機(jī)圖形軟件計(jì)算靜脈橋內(nèi)膜厚度，并用蛋白印記法（Western Blot）對(duì)各組移植靜脈橋中AKT蛋白的磷酸化情況進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：1.藥物干預(yù)人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后，相比于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖與遷移能力均受到明顯抑制，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，流式細(xì)胞儀凋亡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其中晚期凋亡細(xì)胞比例明顯增加，Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)p-AKT表達(dá)明顯減少，p＜0.05，

5、差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.24只兔子行搭橋模型成功，無明顯的手術(shù)切口感染。術(shù)后2周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組A1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為76.57±6.76μm，而同期對(duì)照組B1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為87.32±6.89μm，實(shí)驗(yàn)組組靜脈橋內(nèi)膜厚度較對(duì)照組已經(jīng)稍有減小，p=0.123，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;到4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組A2內(nèi)膜厚度為45.39±9.41μm，對(duì)照組B2組內(nèi)膜厚度為134.07±18.80μm，p＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。無論2周或者4周時(shí)，p