海水浸泡對淺二度燙傷大鼠創(chuàng)面早期影響及其機制的初步探討.pdf

1、目的：
　　近年來隨著我國對海洋開發(fā)的不斷深入，隨著社會發(fā)展，海洋活動日益頻繁，海事人員在受到各種外傷后傷口容易受到海水污染，會對全身造成影響，還有可能影響傷口的修復(fù)。由于受傷環(huán)境限制，患者很難得到較為及時、正確的救治。燒傷合并海水浸泡對傷情的影響也越來越受國內(nèi)外學(xué)者關(guān)注，但迄今為止有關(guān)海水浸泡對淺二度燒傷患者的傷情影響及其處理措施的研究鮮有報道。本研究以5％TBSA淺Ⅱ度燙傷大鼠作為模型，分別從創(chuàng)面組織病理損害特點、創(chuàng)面組織及血

2、清TNF-α、SOD、MDA含量變化等幾方面探討海水浸泡對淺二度燙傷大鼠的傷情影響及可能的作用機制，并探討相關(guān)局部治療，為海上燒、創(chuàng)傷救治提供理論參考依據(jù)。
　　方法：
　　1、實驗分組:SPF級Wistar大鼠70只，體重為180～220g，雄性，隨機分為健康對照組(n=7)、單純燙傷組(n=21)、燙傷+淡水浸泡組(n=21)、燙傷+海水浸泡組(n=21);
　　2、致傷方法:實驗時0.3％戊巴比妥鈉(1ml/10

3、0g)腹腔注射將大鼠麻醉后，使用電動剃毛機去除大鼠背部體毛;除健康對照組組外，將其余各組動物四肢固定，將已脫毛區(qū)域置于70℃恒溫水浴中12s，造成實驗動物5％TBSA淺Ⅱ度燙傷（已經(jīng)病理證實），致傷后再將淡水及海水浸泡組動物背部創(chuàng)面皮膚浸泡于海水中，浸泡時間分別為2h、4h和6h。
　　3、檢測指標及方法:浸泡后2、4、6h切取創(chuàng)面組織做電子顯微鏡及光學(xué)顯微鏡鏡病理學(xué)觀察;取材的同時于眶靜脈叢采血待測，血液行肝素抗凝處理后，立刻提

4、取血清;切取創(chuàng)面皮膚組織樣本，進行組織勻漿處理，提取上清液;用ELISA法測定TNF-α含量，用TBA法測定MDA含量;用羥胺法測定SOD含量;
　　4、數(shù)據(jù)處理:數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示（X±s），采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件析因方差分析、單因素方差分析及LSD、Tamhane、Welch、Brown-Forsythe(B)檢驗比較各組內(nèi)差異（軟件自動略去該統(tǒng)計量值），P＜0.05為顯著性差異。
　　結(jié)果：
　　1、創(chuàng)

5、面組織病理形態(tài)學(xué)觀察:健康對照組鏡下表皮細胞排列整齊、連續(xù)。上皮細胞著色良好。真皮層組織及附屬結(jié)構(gòu)清晰完整，真皮膠原排列整齊。單純燙傷組鏡下可見表皮層次尚清楚，細胞出現(xiàn)腫脹，層次結(jié)構(gòu)尚清楚，細胞核結(jié)構(gòu)不清。表皮內(nèi)有水皰形成，真皮出現(xiàn)水腫、間質(zhì)疏松，血管擴張充血，符合淺二度燙傷病理表現(xiàn)。淡水浸泡組、海水浸泡組動物創(chuàng)面表皮層次減少，部分表皮細胞核結(jié)構(gòu)不清，并有大量炎性細胞浸潤，真皮附件水腫，微血管擴張充血，且隨著浸泡時間增長而加重。

6、　　2、電子顯微鏡下創(chuàng)面形態(tài)學(xué)改變:正常對照組鏡下角質(zhì)層排列整齊、連續(xù)，真皮毛細血管基膜完整，腔內(nèi)絨毛、內(nèi)皮細胞邊緣清晰，形態(tài)飽滿，內(nèi)皮細胞間的連接以及細胞結(jié)構(gòu)清晰可見;單純燙傷組鏡下角質(zhì)層排列紊亂，細胞邊界不清，真皮毛細血管基膜基本完整，腔內(nèi)有紅細胞堆積，內(nèi)皮細胞腫脹，間隙增大，胞質(zhì)松散;淡水浸泡組鏡下角質(zhì)層排列較規(guī)整，毛細血管基膜可見，血管腔中可見紅細胞堆積，內(nèi)皮細胞腫脹，細胞器未見明顯異常;海水浸泡組鏡下可見，角質(zhì)層排列雜亂無章，

7、核固縮，部分細胞器消失，毛細血管基膜消失，可見紅細胞外溢，內(nèi)皮細胞腫脹、胞質(zhì)松散，胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡樣物，失去完整細胞結(jié)構(gòu)，部分細胞皺縮，部分細胞已有脫落，形成空洞;
　　3、創(chuàng)面TNF-α，SOD，丙二醛含量:與健康對照組（63±25）pg/ml比較，單純燙傷組、燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織TNF-α含量在傷后2、4、6h分別為（496±89，263±39，108±19）（1373±15，1742±12，2136±44）pg/mg，

8、明顯增高（P＜0.05或P＜0.01）;燙傷+淡水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織TNF-α含量在傷后2h為（276±46）pg/mg明顯增高(P＜0.01)，在傷后4、6h無明顯變化(P值均大于0.05)。
　　與健康對照組（46±6）U/mg比較，單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織SOD含量在傷后2、4、6h分別為（304±27，259±31，152±14）（258±22，215±15，78±19）U/mg均增高（P＜0.05或P＜0

9、.01）;燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織SOD含量在傷后2、4h分別為（279±28，176±10）U/mg均增高（P值均小于0.01），在傷后6h無明顯變化（P值大于0.05）。
　　單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡、燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織丙二醛含量在傷后2、4、6h分別為（10.9±1.2，14.1±1.5，31.4±2.4）（15.1±1.6，23.9±1.7，41.7±5.4）（19.5±2.3，28.2±3.2，48.±6

10、.9）nmol/mg，明顯高于健康對照組（6.3±0.8）nmol/mg(P值均小于0.01)。
　　4、血清TNF-α，SOD，丙二醛含量:與健康對照組（247±27）pg/ml比較，單純燙傷組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4h分別為（675±122，367±54）pg/ml明顯增高(P＜0.05或P＜0.01)，在傷后6h為（147±27）pg/ml明顯下降(P＜0.01);燙傷+淡水浸泡組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4

11、h無明顯變化(P值均大于0.05)，在傷后6h為（90±24）pg/ml明顯下降(P＜0.01);燙傷+海水浸泡組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4、6h分別為（1646±58，2086±114，2951±58）pg/ml明顯增高（P值均小于0.01）。
　　與健康對照組（364±123）U/ml比較，單純燙傷組大鼠血清SOD含量在傷后2、4h分別為（489±13，447±14）U/ml明顯增高（P值均小于0.05），在傷后6h無

12、明顯變化(P＞0.05);燙傷+淡水浸泡組大鼠血清SOD含量傷后2、4h無明顯變化（P值均大于0.05），在傷后6h為（282±13）U/ml明顯降低（P＜0.05);燙傷+海水浸泡組大鼠血清SOD含量在傷后2h（461±23）U/ml明顯增高（P＜0.05），在傷后4、6h(226±8，205±10)U/ml明顯下降(P值均小于0.01)。
　　與健康對照組（5.4±1.5）nmol/mL比較，單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡組、燙傷

13、+海水浸泡組大鼠血清丙二醛含量在傷后2、4、6h（14.2±1.2，18.2±1.1，39.1±2.7）（18.8±1.2，29.9±1.1，52.6±3.9）（19.1±1.5，35±3.3，55.4±9.8）nmol/mL均明顯增高（P值均小于0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、海水浸泡會加重淺二度燙傷創(chuàng)面炎癥反應(yīng)，從而加深創(chuàng)面損傷。其機制可能為海水高滲、堿性狀態(tài)直接導(dǎo)致機體組織細胞脫水、變性壞死，還有海水低溫強散熱的特點

14、，會導(dǎo)致機體體溫的急劇下降而引起血流動力學(xué)紊亂，從而加深創(chuàng)面損傷程度，使更多的間生態(tài)組織轉(zhuǎn)變?yōu)閴乃澜M織，而壞死組織的增多則會加劇炎癥因子的分泌，進一步加劇機體全身及創(chuàng)面組織損傷。
　　2、海水浸泡會加重淺二度燙傷創(chuàng)面炎癥反應(yīng)創(chuàng)面的氧自由基損傷。其機制可能為海水低溫強散熱的特點直接導(dǎo)致機體微循環(huán)障礙，加重能量代謝紊亂，氧自由基生成增加，過氧化脂質(zhì)反應(yīng)增強。
　　3、大鼠燙傷后合并海水浸泡其炎癥反應(yīng)及氧自由基損傷加重程度與海水浸