可溶性CD40配體對(duì)THP-1細(xì)胞增殖及PI3K、Akt mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討可溶性CD40配體（sCD40L）對(duì)人急性單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞增殖、凋亡及PI3K/Akt通路中PI3K、Akt mRNA表達(dá)的影響。
　　方法：1）以人急性單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞作為研究對(duì)象進(jìn)行培養(yǎng)，加入sCD40L組為實(shí)驗(yàn)組，未加sCD40L組為對(duì)照組；采用CCK-8法檢測(cè)不同濃度sCD40L對(duì)THP-1細(xì)胞體外增殖的影響，并確定最佳干預(yù)濃度；2）采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)sCD4

2、0L對(duì)THP-1細(xì)胞凋亡的影響；3）通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)sCD40L對(duì)THP-1細(xì)胞PI3K、Akt mRNA表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：（1）不同濃度sCD40L對(duì)THP-1細(xì)胞作用24h、48h、72h小時(shí)后均有不同程度的抑制作用，與對(duì)照組相比較，均有顯著差異（p<0.05），其中濃度為4ug/ml對(duì)THP-1細(xì)胞抑制作用最明顯；同一濃度、不同作用時(shí)間下，24h抑制作用最明顯，隨著時(shí)間延長(zhǎng)抑制率逐漸降低；（2）Annexin

3、V-FITC/PI雙染法顯示，THP-1細(xì)胞與4ug/ml sCD40L共育24h、48h、72h后，均見(jiàn)明顯凋亡，與對(duì)照組相比較有顯著差異（p<0.05）。不同作用時(shí)間下，在24h時(shí)對(duì) THP-1細(xì)胞凋亡作用最明顯，隨著時(shí)間延長(zhǎng)凋亡率逐漸降低；（3）實(shí)時(shí)熒光定量 PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，在同一時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，PI3K、Akt mRNA的表達(dá)量明顯下調(diào)，提示PI3K/Akt通路受到抑制，與對(duì)照組相比較均有顯著差異（p﹤0.05）