鹽脅迫下旱柳cDNA文庫的構(gòu)建及耐鹽基因的篩選.pdf_第1頁
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1、三峽大學碩士學位論文鹽脅迫下旱柳cDNA文庫的構(gòu)建及耐鹽基因的篩選姓名：楊曄申請學位級別：碩士專業(yè)：藥理學指導教師：何正權(quán)卓仁英20090401IIIAbstractSaltstresscausedbythesalinizationofsoilisamainenvironmentalfactrestrainingplantgrowthyieldwhichseverelyrestrictsthedevelopmentofmodernagr

2、iculturefestry.Studiesonthemolecularmechanismofplantsalttolerantcultivatingnewvarietyofplantresistingsaltstressareofgreatsignificancefdevelopingutilizingsalinealkalisoil.SalixmatsudanaKoidzisagoodmaterialtostudythesaltre

3、sistancemolecularmechanismsearchnewgenesalttolerantbecauseithasahighabilitytoresistdroughtsaltstress.Nowawaythestudiesonsaltresistancemolecularmechanismsearchingnewgenesalttolerantarelimitedbothathomeabroad.Itisnecessary

4、tousethisvaluableresourcetodevelopdroughttolerantgene.Itwillprovideanewbreedingwayffestcropstoimprovesalttolerance.AcDNAlibrarywasconstructedfromthetissueofSalixmatsudanaKoidztreatedwith100mmolLNaCl.Differentconcentratio

5、nsofNaClstresswascarriedouttodealwithyeasttransfmantslibrary.TwosaltrelatedgeneinitiallyidentifiedclonedbyextractingplasDNAPCRsequencingfpositiveyeastclones.Structurefunctionofproteinwerepredictedthroughbioinfmaticsanaly

6、sisofgenesequences.RealtimePCRwascarriedouttoanalysisexpressionmodeofgene.Themainresultsareasfollows:1）cDNAlibraryofSalixmatsudanaKoidztreatedwithNaClwasconstructed.Exogenousgenehasbeensuccessfullytransferredtoyeastcells

7、throughplasidentificationPCRAmplification.ThecDNAfragmentsedarebetween5002000bpwithanaveragelengthofabout1000bp.Itshowsthatthelibraryisahighqualityone.IthadcreatedthepreconditionstoconstructSalixfulllengthcDNAlibraryffun

8、ctionalgenomicsresearch.2）cDNAlibraryofSalixmatsudanaKoidztreatedwithNaClwasedbygraduallyimprovingconcentrationofNaCl.Twoyeasttransfmantswithtolerance130gLNaClwereobtained.ThetwocDNAfragmentsedwereidentifiedas615bp1152bp

9、throughplasidentificationPCRAmplification.TheresultsofsequencingblastshowedthatthecDNAof1152bpissalttolerantrelatedgenes.3）Bioinfmaticsanalysisshowsthatthereisalongopenreadingframeof297bpinthepositionofthegenesequencefro

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