一個水稻持綠突變體的鑒定及其基因精細定位.pdf

1、葉綠素是植物進行光合作用的重要色素，在光合作用的能量捕獲及能量傳遞中起著重要的作用。本課題研究的材料是由粳稻中花11品種經過γ射線輻射得到的一個可遺傳的持綠突變體，暫命名D101。本課題通過水稻持綠突變體的表型鑒定、水稻持綠突變體的遺傳分析及其基因精細定位和水稻持綠突變體的高通量重測序及候選基因分析三方面進行研究。研究結果如下:
　　1.表型鑒定:大田播種后，45天時，發(fā)現突變體水稻D101的葉片的綠色要深，突變體D101的葉綠素

2、a含量相對于野生型水稻中花11的葉綠素含量顯著性提高;直到90天成熟時，表現極顯著性提高。葉綠素b的含量和類胡蘿卜素的含量至90天成熟時，表現極顯著性提高。農藝性狀調查也發(fā)現突變體D101的千粒重顯極顯著提高。細胞及亞細胞結構分析中，石蠟切片野生型中花11和突變型D101在結構上沒有明顯的區(qū)別，掃描電鏡發(fā)現野生型中花11的氣孔關閉的時候，突變型D101的氣孔處于打開或半打開的狀態(tài)。透射電鏡發(fā)現突變體D101的劍葉的細胞上的葉綠體上充滿淀

3、粉粒，而野生型中花11穎殼的細胞的葉綠體則充滿淀粉粒。
　　2.遺傳分析及其基因精細定位:通過對中花11×D101雜交F2代群體大田調查作遺傳分析，發(fā)現控制該持綠性狀的基因是單基因控制的。對中花11×巴香占雜交F2代群體的定位群體大田調查取樣后，用均勻分布在12條染色體上的親本間的多態(tài)引物，進行基因初步定位，最后定位在1號染色體上。擴大群體后，并設計多態(tài)引物，精細定位在分子標記ID21-RM11860之間，約525kbp。