PTH(1-34)對人成骨肉瘤細胞MG63基質(zhì)Gla蛋白及Wnt-β-catenin信號通路表達的影響.pdf

1、目的：觀察PTH（1-34）對人成骨肉瘤細胞MG63基質(zhì)Gla蛋白（MGP）、及Wnt/β-catenin信號通路表達的影響，探討PTH（1-34）在防治骨質(zhì)疏松癥中可能的新分子機制。
　　方法：（1）不同濃度PTH（1-34）（10-M9、10-8 M、10-7M）干預MG63,尋找最有效的劑量；（2）10-7M PTH（1-34）、200ng/ml DKK-1、10-7M PTH（1-34）+200ng/ml DKK-1干預M

2、G63后；提取總MGP的mRNA及總蛋白，用Western-blot及熒光實時定量RT-PCR檢測相關因子蛋白及基因水平的表達情況；（3）堿性磷酸酶（ALP）染色及活力測定檢測PTH及Dkk-1干預后細胞分化情況。
　　結果：1、PTH（1-34）上調(diào)MGP基因的表達，MGP mRNA的表達分別是對照組的2.56倍、4.14倍、7.81倍（*P<0.05，**P<0.01），且呈劑量依賴性增高；2、PTH增強MG63細胞ALP活力

3、， Dkk-1抑制ALP活性，Dkk-1與PTH聯(lián)用阻斷PTH上調(diào)ALP活力（P<0.05）；3、PTH上調(diào)MGP及Wnt/β-catenin信號通路中相關因子LRP5、β-catenin、Runx2 mRNA及蛋白水平,其中mRNA分別是對照組的2.65、4.01、3.48倍(*P<0.05，**P<0.01)；DKK-1對PTH（1-34）促MGP表達沒有影響，但大部分阻斷了Wnt/β-catenin信號通路中相關因子的表達。