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1、中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院碩士學(xué)位論文三種昆蟲多糖的分離純化與免疫活性研究姓名:孫龍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:馮穎20070701(3)分離純化研究利用DEAESepharose離子交換柱層析和SephadexG100凝膠柱層析對(duì)多糖進(jìn)行純化,從蠶蛹粗多糖中分離得到兩個(gè)組分PSPPS1和PSPPS2,喙尾琵琶甲一個(gè)組分PBFPS3,蜂螂粗多糖一個(gè)組分PCPS2。其中PCPS2經(jīng)純度鑒定,初步判定為純品,理化指標(biāo)檢測(cè)多
2、糖含量4584%,蛋白含量3915%可能是糖一蛋白復(fù)合物。其他組分有待進(jìn)一步檢測(cè)。(4)三種粗多糖免疫活性研究和急性毒性對(duì)三種粗多糖進(jìn)行了小鼠免疫調(diào)節(jié)功能和急性毒性試驗(yàn),免疫結(jié)果顯示,蠶蛹粗多糖能顯著提高ICR種小鼠的脾臟指數(shù)、巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和血清溶血素oD值,表明蠶蛹粗多糖具有較好的提高機(jī)體非特異性免疫、細(xì)胞免疫、體液免疫的功能;喙尾琵琶甲粗多糖和蟑螂粗多糖能顯著提高ICR種小鼠的脾臟指數(shù)、巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和血清溶血
3、素oD值,但對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率影晌不明顯,表明喙尾琵琶甲租多糖和蟑螂粗多糖對(duì)小鼠非特異性免疫和體液免疫功能有調(diào)節(jié)作用,對(duì)細(xì)胞免疫功能的調(diào)節(jié)作用不明顯。急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,蠶蛹和蟑螂粗多糖的最大耐受量(MTD)是500oIng/kg體重,喙尾琵琶甲粗多糖的半數(shù)致死量L050為49243mg/kg體重。研究結(jié)果表明,蠶蛹多糖適宜采用堿液法提取,喙尾琵琶甲多糖和蟑螂多糖宣用蛋白酶水解法提取;三氯乙酸法和過氧化氫法脫除三種昆蟲多糖的蛋白和色素效
4、果較好:DEAESepharose離子交換柱層析和SephadexG100凝膠柱層析可以較好地分離三種昆蟲多糖的各組分:蠶蛹粗多糖具有較好的非特異性免疫、細(xì)胞免疫、體液免疫功能,喙尾琵琶甲粗多糖和蟑螂粗多糖對(duì)小鼠非特異性免疫和體液免疫功能有調(diào)節(jié)作用,對(duì)細(xì)胞免疫功能的調(diào)節(jié)作用不明顯。本論文首次利用蠶蛹、喙尾琵琶甲和蟑螂為原料,對(duì)這三種昆蟲體內(nèi)的多糖進(jìn)行了較系統(tǒng)深入的研究,首次發(fā)現(xiàn)蟑螂和云南民間藥用昆蟲喙尾琵琶甲的酶解醇沉物具有非特異性免疫
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