細胞周期依賴性表達的BRCA1相關中心體蛋白Bacp-Nlp在腫瘤中的擴增及降解機制研究.pdf_第1頁
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1、Bacp/Nlp(BRCA1相關中心體蛋白/Ninein樣蛋白)是利用BRCA1蛋白的C末端，通過酵母雙雜交實驗自行定位克隆的位于20號染色體上的一個中心體蛋白。前期的研究工作表明：Bacp/Nlp基因可能為一潛在癌基因。 第一部分，第一次證明了Bacp/Nlp的蛋白表達具有細胞周期依賴性，它是通過泛素化途徑降解，這一過程由后期促進復合體(APC)催化完成。Bacp/Nlp可以與后期促進復合體(APC)發(fā)生物理上的相互作用，并

2、且通過Bacp/Nlp與Cdc20或Cdhl之間的結合實驗及對內源性Cdc20和Cdh1的RNA干擾實驗進行了驗證。構建了破壞框(Destruction Box)和KEN框序列突變的Bacp/Nlp質粒來研究其降解機制。研究發(fā)現(xiàn)這些突變體可以大大增強Bacp/Nlp蛋白的穩(wěn)定性并且可以引起其惡性程度增加和多核細胞的增多。 第二部分，通過免疫組化、Western Blot、RT-PCR和PCR的方法，分別從組織、蛋白、mRNA、

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