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文檔簡介
1、華中農業(yè)大學碩士學位論文植物染色體DNA重要組成因子——端粒和著絲粒序列的研究姓名:張偉申請學位級別:碩士專業(yè):發(fā)育生物學指導教師:孟金陵20050501華中農業(yè)大學2005屆碩士學位論文氨凝膠電泳的方法,我們對比了質粒雙酶切和PCR擴增兩種檢測方法檢測插入端粒序列長度大小的可靠性。通過在30“0條件下對所得端??寺∵B續(xù)接種繼代培養(yǎng),發(fā)現培養(yǎng)過程中端粒的復制是穩(wěn)定的。研究結果可能從方法學上,對如何將短重復序列插入到質粒載體中、準確的鑒定
2、插入的重復序列的長度、判斷大腸桿菌的培養(yǎng)條件是否基本滿足了重復序列復制相對穩(wěn)定的需要以盡量完好的保存所獲得的高度重復序列克隆具有一定的意義本實驗室還通過利用H#MIII酶切油菜基因組DNA后,回收特異性的180bp著絲粒衛(wèi)星序列連接到載體中的方法獲得了包含甘藍型油菜著絲粒衛(wèi)星序列的克隆。白菜基因組(從)中有兩種類型的著絲粒衛(wèi)星家族序列,我們也有理由推論,甘藍型油菜(AACC)和芥菜型油菜(AABB)中至少也存在兩種以上的著絲粒衛(wèi)星家族序
3、列。進一步分離和分析這些不同亞種的著絲粒衛(wèi)星家族,可以使我們更加深入的理解它們的進化關系,或許還可以幫助我們更加有效、更加方便的選育油菜優(yōu)良品種。,蕊;一真核生物的染色體三大關鍵成份便是端粒,著絲粒、自主復制序列擁有了這三個必需的成份,人們便有可能嘗試著構建新型的轉化載體——人工染色體。人工染色體可以一次性的將很多控制優(yōu)良性狀的基因方便的帶入到真核細胞中,而且沒有TDNA轉化時隨機插入容易引起的細胞中原功能基因失活的現象,因此是一種非常
4、優(yōu)良的載體。目前哺乳動物和人類的人工染色體已經構建成功,美國芝加哥大學Preuss和中國科學院遺傳與發(fā)育研究所的程祝寬研究員等領導的課題組也分別正在構建擬南芥和水稻的植物人工染色體。我們實驗室已經分離到了油菜的著絲粒序列、油彩的端粒序列(即本文中分離到的植物界絕大部分植物通常具有的擬南芥TTTAC_rGG序列類型,油菜的端粒序列也屬于該類型),希望能夠利用已經獲得的甘藍型油菜著絲粒衛(wèi)星序列作為探針篩選已經構建好的甘藍性型抽菜的BAC庫,
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