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文檔簡介
1、目的:檢測腫瘤細胞上清液對成纖維細胞的激活的最佳濃度及最佳濃度的條件培養(yǎng)液激活成纖維細胞后血管內(nèi)皮生長因子(VEGF-A)的表達的變化規(guī)律。
方法:用MTT法和流式細胞凋亡術(shù)測定成纖維細胞在不同濃度條件培養(yǎng)液中的生長變化與凋亡率。用RT-PCR,Western blot,免疫組化檢測成纖維細胞的α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)與VEGF-A的表達。
結(jié)果:MTT法發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞上清液與2×DMEM:F12比例為1:1時
2、,對成纖維細胞的生長有明顯的促進作用,其生長速度快于其它濃度(P<0.05)。流式細胞凋亡術(shù)檢測表明隨著腫瘤細胞上清液濃度的提高,成纖維細胞的凋亡率也上升,1:1的凋亡率與1.5:1時有差異(P<0.05)。腫瘤細胞上清液組成的條件培養(yǎng)基能促進成纖維細胞α-SMA與VEGF-A穩(wěn)定的表達,二者在培養(yǎng)后第1天都開始表達,第3天表達量達到峰值,第三天以后表達穩(wěn)定。
結(jié)論:當腫瘤細胞上清液與2×DMEM:F12比例為1:1時,能有效
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