結腸黑變病差異蛋白質譜分析.pdf

1、目的：
　　通過利用有關差異蛋白質組學相關技術（雙向凝膠技術以及生物質譜分析技術）尋找出關于結腸黑變?。∕C）與結腸癌、正?；颊卟町惐磉_的蛋白質質譜圖，應用Mascot軟件在NCBInr數(shù)據(jù)庫檢索比對差異的蛋白質，在生物蛋白質分子水平探討結腸黑變病與結腸癌之間的關聯(lián)及差異的蛋白質，分析與臨床意義相關聯(lián)的蛋白質分子。
　　方法：
　　通過雙向凝膠電泳技術（2-DE）獲取MC與結腸癌及正常組織之間的差異蛋白質凝膠圖，結合軟

2、件分析和手工篩選，查找凝膠圖中表達差異大于1.5倍的蛋白質斑點，選出的差異點后通過酶解及生物質譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS）獲取相關的差異蛋白質信息并進行分析，了解其功能及產(chǎn)生差異機制。
　　結果：
　　根據(jù)MC與正常結腸黏膜、結腸癌的二維凝膠掃描顯示圖像分析獲得的蛋白質斑點數(shù)量為1970±138，2028±176、2150±240，應用imagemaster7.0軟件進行圖像對比分析后，總共找到倍比大于1.5倍

3、的蛋白質斑點14個。結腸黑變?。∕C）和正常結腸組織相比較表達的量的差異大于1.5倍的點有6個，其中在結腸黑變病黏膜組織中表達上調的差異點有2個，表達下調的差異點有4個，僅在結腸黑變病黏膜組織中表達的差異點有1個（P＜0.05）；結腸黑變病黏膜組織與結腸癌黏膜組織對比表達的量的差異大于1.5倍的點有8個，其中在結腸黑變病黏膜組織中表達上調的差異點有1個，在結腸癌黏膜組織中表達上調的差異點有7個。僅在結腸癌黏膜組織中表達的蛋白質點有2個（

4、P＜0.05）。質譜分析和數(shù)據(jù)庫檢索共鑒定出8種蛋白質，包括KRT8/18、FGB fibrinogen、CAT Catalase、PSMC626S protease、TPM4等。
　　結論：
　　生物質譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS）很好地顯示MC組織與結腸癌組織以及正常結腸組織間的蛋白質表達差異，為MC、結腸癌的研究提供新思路、新線索。本研究最終所鑒定出的8種不同表達的蛋白質，這些蛋白的不同表達表明可能參與結腸