大鼠肝移植模型的磁共振彌散成像與氫質子波譜成像研究.pdf

1、心臟停搏供體(NHBD)作為肝移植供肝來源的重要途徑之一，是目前關注的焦點。研究發(fā)現(xiàn)NHBD供體肝移植術后原發(fā)移植肝無功能的發(fā)生率較高，熱缺血再灌注損傷是主要的影響因素。在熱缺血再灌注損傷的病理生理過程中，肝細胞是主要的損傷靶點，枯否氏細胞的激活，氧自由基和細胞因子的大量釋放可能會促進細胞外基質的沉淀，也促進損傷肝細胞的再生，病理表現(xiàn)為移植肝膠原纖維增多，肝細胞的再生能力的增強，目前關于這方面研究較少。磁共振彌散成像能夠定量檢測各種肝炎

2、后肝纖維化，氫質子波譜成像的膽堿峰可用來反應細胞的增牛能力。在本研究中，我們通過重建肝動脈的大鼠原位肝移植模型，采用磁共振彌散成像和氫質子波譜成像，結合組織病理分析，研究熱缺血再灌注損傷對于移植肝細胞外基質的沉積以及肝細胞損傷后細胞再生能力的影響。 第一部分 重建肝動脈的大鼠肝移植模型建立方法的實驗研究 目的： 探討一種穩(wěn)定性好、重復性強的大鼠原位肝移植模型的建立方法。 方法：選用體重220g-260g

3、的健康、SPF級雄性SD大鼠。利用Kamada“二袖套法”吻合肝上下腔靜脈、肝下下腔靜脈和門靜脈。參照Lehmann所述方法將供體的腹腔動脈與受體的肝總動脈通過24G靜脈留置針自制動脈支架吻合。采用夾閉心臟基底部的方法制作熱缺血模型。術后記錄肝移植供體手術時間，供肝修整時間、無肝期、受體手術時間、動脈吻合時間、手術成功率(受體術后存活24小時以上)及術后并發(fā)癥和死亡原因等。術后6小時、第1天、3天、7天、14天及30天開腹取肝組織時解剖

4、肝門處。 結論：利用支架法吻合供體腹腔動脈及受體肝總動脈的方法建立的重建肝動脈血供的大鼠原位肝移植模型，操作簡便、耗時短、通暢率高、對正常生理干擾小，是一種穩(wěn)定性好、可重復的重建肝動脈血供的大鼠肝移植模型。無熱缺血組的移植手術成功率高于熱缺血組。 第二部分 磁共振彌散成像對于熱缺血再灌注損傷引起移植肝膠原纖維沉積的定量研究 目的： 采用第一部分制作的熱缺血和無熱缺血兩組大鼠原位肝移植模型，通過磁共振DW

5、I和組織學分析研究移植肝術后早期膠原纖維含量的變化，以及熱缺血對于術后移植肝膠原纖維沉積的影響。 方法：熱缺血組的大鼠肝移植模型和無熱缺血組大鼠肝移植模型各36只為研究對象，采用1.5T磁共振對移植術后各個時間點(6h、1d、3d、7d、14d、30d)每只大鼠行肝臟常規(guī)T1WI、T2WI成像及彌散成像(b值選取0,600,800及1000)。掃描后抽血測血清酶學(ALT、GGT、TBIL)代謝水平，然后取肝臟，進行HE、Mas

6、son染色，對于匯管區(qū)炎癥細胞浸潤程度進行半定量評分，測定膠原纖維陽性面積百分比，同時取材進行透射電鏡分析。 結論：熱缺血再灌注損傷促進了移植肝細胞外膠原纖維的沉積。DWI可以敏感、準確的監(jiān)測大鼠移植肝細胞水腫和細胞外膠原纖維沉積的變化。血清酶學指標及匯管區(qū)炎癥細胞浸潤程度不能很好的反映移植肝膠原纖維的沉積的變化情況。 第三部分 氫質子波譜成像對熱缺血再灌注損傷大鼠移植肝細胞再生能力的評價研究 目的：探

7、討磁共振氫質子波譜評價大鼠原位肝移植熱缺血模型肝細胞損傷后再生能力的意義，以及熱缺血對于移植肝再牛能力的影響。 方法：以熱缺血組的大鼠肝移植模型和無熱缺血組大鼠肝移植模型各36只為研究對象，移植術后分6個時間點(6h、1d、3d、7d、14d、30d)對使用1.5T磁共振對每只大鼠的肝臟行常規(guī)T1WI、T2WI成像及氫質子波譜掃描。1H-MRS檢查使用PRESS序列：TR/TE=1500msec/35msec。掃描后取肝臟，測定