《傷寒論》泄熱三方對AS模型大鼠炎癥機制影響的比較研究.pdf

1、動脈粥樣硬化類疾病的發(fā)病率在我國乃至全世界呈現(xiàn)逐年上升趨勢,從最初的脂質浸潤學說到當今的炎癥學說,國內外醫(yī)學工作者從未間斷過對其發(fā)病機制的研究。既往及現(xiàn)有的研究結果一致認為,動脈粥樣硬化(AS)的形成與發(fā)展與脂質沉積、動脈內皮損傷、血管平滑肌細胞遷移及增殖、血小板的聚集、炎性因子的異常分泌等因素密切相關。隨著研究的深入,炎癥及免疫機制在AS的形成、發(fā)展過程中起著越來越重要的作用,控制或阻斷炎性機制通路及抑制炎癥因子的表達,正成為防治AS

2、新的研究方向。
　　 近些年來祖國醫(yī)學防治AS類疾病的療效已得到醫(yī)學界的認可,許多經方被應用于AS類疾病的臨床治療,其治療AS的基礎及臨床研究均取得了一定的進展。但當今大多數(shù)學者偏重于從血瘀、痰濁等方面進行論治,而從熱毒辨治的報道相對較少。中醫(yī)清熱解毒類藥物有類似于西藥“抗炎”的作用,且其治療AS的作用機制亦有相關基礎性研究報道。針對當前中西醫(yī)學者對AS病理實質所提出的熱毒致病和炎癥學說,立足于炎癥機制的角度,在應用活血及化痰藥

3、物的同時使用清熱解毒類藥物,或在西醫(yī)常規(guī)降脂的基礎上聯(lián)合清熱解毒類藥物,可為中西醫(yī)結合防治AS類疾病提供一個新的切入點。
　　 目的
　　 桃核承氣湯、小陷胸湯、大黃黃連瀉心湯是《傷寒論》中總體上具有清泄邪熱作用三首經方,然又根據(jù)其組方不同,三方在泄熱的同時分別側重于活血、化痰、清熱三個方面。既往的實驗及臨床研究報道發(fā)現(xiàn),三方均有防治AS類疾病的作用。本實驗旨在探討《傷寒論》三方對動脈粥樣硬化大鼠核轉錄因子-κB(NF-

4、κB)及其所介導的炎癥因子之間的影響作用,以探明泄熱類經方對AS類疾病炎癥機制的作用機理。同時,也從側重活血、化痰、清熱三個不同方面觀察《傷寒論》三方對炎癥機制作用的不同,為臨床防治AS類疾病提供理論依據(jù),具有一定的理論及臨床意義。
　　 方法
　　 1.理論研究:通過文獻梳理祖國醫(yī)學對AS病名、病機的認識;探討中醫(yī)傳統(tǒng)病因學、中醫(yī)臟腑病變與AS的關系。梳理《傷寒論》三方歷代臨床研究及現(xiàn)代抗AS的實驗研究情況。
　

5、　 2.實驗研究:通過建立大鼠AS模型,觀察《傷寒論》三方對AS炎癥機制的影響作用,比較三方作用的差異。具體方法如下:
　　 ①通過病理切片觀察AS大鼠主動脈形態(tài)學的改變;觀測主動脈內膜、中膜厚度的改變情況;
　　 ②運用ELISA法檢測AS大鼠血清中ox-LDL、VCAM-1、IL-6濃度;
　　 ③運用免疫比濁法測定AS大鼠血清CRP含量;
　　 ④運用免疫組化法測定AS大鼠主動脈中CD40表達水平

6、;
　　 ⑤運用Western blot法測定AS大鼠主動脈中NF-κB表達情況。
　　 結果
　　 1.通過理論研究及整理發(fā)現(xiàn):祖國醫(yī)學認為動脈粥樣硬化的形成與心、肝、脾、腎、肺密切相關,總體上為本虛標實之證;瘀血、痰濁、氣滯、熱毒、濕熱是其形成的主要病理因素;《傷寒論》三方從臨床及實驗研究來看均有防治AS的作用。
　　 2.通過實驗研究發(fā)現(xiàn):
　　 ①光鏡下觀察《傷寒論》三方AS大鼠主動脈切片

7、發(fā)現(xiàn):三方均能保護動脈內皮,明顯抑制平滑肌細胞的增殖和遷移,抑制炎性細胞的分泌和浸潤,阻止動脈粥樣硬化斑塊的形成。通過對中藥組大鼠主動脈切片內膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)厚度統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn),三方IT、MT的數(shù)值與病理模型組相比均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn),桃核承氣湯組IT、MT數(shù)值與其它兩組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　 ②通過對《傷寒論》三方AS大鼠血清ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP的檢

8、測結果分析發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn):小陷胸湯組ox-LDL的水平與其它兩組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);桃核承氣湯組VCAM-1的水平與其它兩組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);大黃黃連瀉心湯組IL-6的水平與其它兩組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組CRP水平與小陷胸湯組相比有統(tǒng)計學差異(P＜0.05),桃核承氣湯組

9、、大黃黃瀉心湯組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 ③通過對《傷寒論》三方AS大鼠主動脈CD40的陽性光密度值統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠CD40的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。組間比較發(fā)現(xiàn):桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組CD40水平與小陷胸湯組相比有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);桃核承氣湯組、大黃黃瀉心湯組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 ④通過對《傷寒論》三方AS大鼠主動脈NF

10、-κB的Western blot檢測結果分析發(fā)現(xiàn):中藥組大鼠NF-κB的水平與病理模型組相比有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。經組間比較發(fā)現(xiàn):桃核承氣湯組NF-κB水平與其它兩方有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　 ⑤用直線相關分析中藥組NF-κB與ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP、CD40之間的直線相關系數(shù)(r),結果為:桃核承氣湯組:0.872、0.854、0.861、0.897、0.811(P＜0.05);小陷胸湯

11、組:0.892、0.754、0.844、0.654、0.731(P＜0.05);大黃黃連瀉心湯組:0.677、0.737,0.878、0.891、0.802(P＜0.05)。
　　 結論
　　 1.《傷寒論》三方均能有效地抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成。其中,桃核承氣湯對AS大鼠主動脈形態(tài)學改變的保護作用相對最好。
　　 2.《傷寒論》三方不但對NF-κB、ox-LDL、VCAM-1、IL-6、CRP、CD40等單個