番茄灰霉病拮抗菌篩選及復(fù)合生物海藻液肥研制.pdf

1、番茄灰霉病菌是由半知菌亞門灰葡萄孢屬（Botrytis cinerea）真菌侵染所引起對(duì)番茄危害較重的病害，影響果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)。篩選灰霉病拮抗菌并制備生物菌肥是生物防治植物病害的重要途徑。目前，對(duì)生物菌肥的研究大多數(shù)針對(duì)一種拮抗菌，單一菌株的防病效果較復(fù)合菌株低，防治效果不理想。鑒此，本研究從寧波番茄保護(hù)地健康植株根際土壤篩選出兩株對(duì)番茄灰霉病菌有高效抑制作用的菌株LM-Y和LM-N，對(duì)其進(jìn)行鑒定，研究復(fù)合菌株對(duì)番茄灰霉病的抑菌特性及適

2、宜發(fā)酵條件，以海藻液為載體制備復(fù)合生物海藻肥，通過(guò)室內(nèi)盆栽試驗(yàn)來(lái)初步探究海藻菌肥的防病和促生長(zhǎng)效果，為生產(chǎn)復(fù)合微生物肥料提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1、番茄灰霉病拮抗菌的分離鑒定。采用稀釋涂布及平板劃線法分離純化菌株，平板對(duì)峙法初篩得到24株對(duì)番茄灰霉病菌具有拮抗作用的生防菌。以水稻赤霉病菌和油菜立枯絲核菌為指示菌，復(fù)篩選取對(duì)兩種病原菌均有拮抗作用的菌株最終得到2株高效抑制番茄灰霉病菌的菌株，分別命名為L(zhǎng)M-Y和LM-N。結(jié)

3、合形態(tài)特征、生理生化分析和16s rDNA序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，鑒定LM-Y為解淀粉芽孢桿菌，LM-N為甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌。
　　2、拮抗菌株液體發(fā)酵條件優(yōu)化。拮抗試驗(yàn)表明菌株LM-Y和LM-N具有親和性，可以混合發(fā)酵。復(fù)合菌株搖床發(fā)酵培養(yǎng)的最適發(fā)酵條件為:初始pH7.0，接種量5％，裝液量90mL(250mL三角瓶)，發(fā)酵時(shí)間48h，搖床溫度29℃，轉(zhuǎn)速180r·min-1，最佳接種比例為L(zhǎng)M-Y∶LM-N=1∶2，培養(yǎng)所得發(fā)酵液

4、對(duì)番茄灰霉菌的抑菌直徑較單菌株分別提高了了44.31％和32.47％。
　　3、復(fù)合生物海藻菌肥的制備及防病增產(chǎn)效果評(píng)價(jià)。不同濃度復(fù)合生物海藻菌肥處理番茄種子可增加種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)，其中400倍液處理效果最佳。盆栽試驗(yàn)定期統(tǒng)計(jì)番茄灰霉病的發(fā)病情況和測(cè)定番茄根際土壤中病原菌數(shù)量變化，測(cè)定番茄的株高、莖粗及收獲后的單果重。結(jié)果表明，施用復(fù)合生物海藻液肥（處理5）和復(fù)合菌株發(fā)酵液（處理3）可抑制灰霉病病原菌繁殖，病情指數(shù)比只接種病原