BMS-345541對大鼠脊髓損傷后粒細胞浸潤及運動功能影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究在大鼠急性脊髓損傷模型中，傷后早期硬膜下注射BMS-345541，觀察其對脊髓組織中粒細胞浸潤和后肢運動功能的影響。
　　 方法：
　　 1.60只健康成年雌性SD大鼠(200-220克)隨機分為三組，A組(假手術(shù)組，)僅做T12椎板切除術(shù)，暴露脊髓，并直接縫合切口，其余兩組用改良Allen's打擊法損傷脊髓；B組(對照治療組)傷后硬膜下注射10μl1％DMSO生理鹽水；C組(BMS-345541治療組)傷后硬

2、膜下注射10μl BMS-345541溶液。用于Westernblot檢測分析和髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性檢測的大鼠術(shù)后24h灌注，取標本。進行運動功能分析的大鼠術(shù)后飼養(yǎng)至14d，觀察時間點為：1d，3d，7d,14d。
　　 2．采用BBB評分方法，觀察大鼠后肢功能恢復情況。
　　 3．取術(shù)后24h大鼠脊髓用Western blot檢測分析的方法，觀察各組動物脊髓樣本的NF-κB p65

3、及ICAM-1表達情況，用圖像分析系統(tǒng)計算各樣本IOD值，進行統(tǒng)計學分析。
　　 4．取術(shù)后24h大鼠脊髓，使用紫外可見光分光光度計檢測蛋白樣品OD值，根據(jù)公式計算MPO的活性，進而判斷粒細胞浸潤程度，并進行統(tǒng)計學分析。
　　 5．統(tǒng)計學處理：實驗數(shù)據(jù)以X±S表示，使用SPSS13.0軟件包進行單因素分析，以P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1．同A組比較，B，C兩組脊髓打擊傷后，運動功

4、能逐漸恢復，從第7d開始，C組BBB運動功能評分較B組明顯增加，達到7.42±0.79，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0，05)。
　　 2．通過Western blot檢測發(fā)現(xiàn)A組蛋白樣品中NF-κB p65及ICAM-1均呈低表達，SCI術(shù)后24h的B組蛋白樣品中NF-κB p65及ICAM-1表達均明顯升高，而經(jīng)過治療后C組中的蛋白表達較B組的明顯減少，通過各組IOD值計算，以上差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　

5、 3.根據(jù)檢測蛋白樣品的OD值，計算MPO活性，發(fā)現(xiàn)SCI術(shù)后24h的B組的MPO活性明顯較A組和C組的高，而經(jīng)過BMS-345541治療后的C組的MPO活性雖比A組的高，但較B組的有明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、BMS-345541可促進大鼠SCI后肢體運動功能改善。
　　 2、BMS-345541可抑制大鼠SCI后NF-κB p65過度活化，進而抑制ICAM-1的表達