褐藻膠寡糖納米脂質(zhì)體的制備及其生物學(xué)功能研究.pdf

1、褐藻膠寡糖是由α-L-古洛糖醛酸(GulA)、β-D-甘露糖醛酸(ManA)或者二者雜合段通過(guò)β-1,4糖苷鍵連接而成的一種低聚物。作為無(wú)毒、無(wú)免疫原性、可生物降解的低聚糖，褐藻膠寡糖具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化等生物學(xué)活性，提高其生物利用度可以更好地發(fā)揮其功能。脂質(zhì)體是具有膜狀磷脂雙層分子微囊泡，作為載體能夠有效運(yùn)輸活性物質(zhì)穿過(guò)細(xì)胞膜。本課題通過(guò)響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化褐藻膠寡糖納米脂質(zhì)體制備的工藝參數(shù)，探討其對(duì)南美白對(duì)蝦的保水效果，并對(duì)其抗菌

2、、抗氧化和抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用進(jìn)行研究。主要結(jié)果如下：
　　1、采用逆相蒸發(fā)法制備褐藻膠寡糖納米脂質(zhì)體，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)值優(yōu)化得到最優(yōu)的制備方案：脂膽比為5.12:1，褐藻膠寡糖濃度為8.44mg/mL，吐溫含量為1.11％，外內(nèi)水相之比為5.25:1，此時(shí)的包封率最高，為65.84%，粒徑為323nm。
　　2、為了研究褐藻膠寡糖納米脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，分別從pH、溫度、超聲時(shí)間、貯藏時(shí)間以及模擬胃腸液環(huán)境這幾個(gè)方面分析對(duì)其

3、釋放率的影響。結(jié)果表明，褐藻膠寡糖脂質(zhì)體在過(guò)酸和高溫環(huán)境時(shí)，其膜結(jié)構(gòu)會(huì)遭到破環(huán)，穩(wěn)定性發(fā)生改變；超聲時(shí)間增加，也會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體的釋放率上升。脂質(zhì)體在4℃冰箱存放14d，釋放率不超過(guò)3%。模擬胃腸液環(huán)境的實(shí)驗(yàn)表明，在胃腸道中，納米脂質(zhì)體能夠保護(hù)褐藻膠寡糖免受環(huán)境的影響，其脂質(zhì)體的穩(wěn)定性較好。
　　3、為了提高蝦仁的保水品質(zhì)，以南美白對(duì)蝦為原材料進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，得到最優(yōu)保水劑配方為褐藻膠寡糖脂質(zhì)體:氯化鈉:碳酸氫鈉:檸檬酸三鈉

4、:山梨糖醇為2:1:1:2:2。使用該保水劑處理得到的蝦仁其浸漬增重率為11.76%，解凍增重率為8.18%，蒸煮損失率為7.23%。利用該配方配制褐藻膠寡糖的復(fù)合無(wú)磷保水劑，考察并比較蒸餾水、復(fù)合磷酸鹽、褐藻膠寡糖復(fù)合保水劑、褐藻膠寡糖脂質(zhì)體復(fù)合保水劑對(duì)蝦仁的保水效果。結(jié)果表明，蒸餾水、復(fù)合磷酸鹽、褐藻膠寡糖復(fù)合無(wú)磷保水劑組的蝦仁浸泡增重率分別為5.37%、9.81%、10.19%，褐藻膠寡糖脂質(zhì)體復(fù)合無(wú)磷保水劑組的蝦仁浸泡增重率為1

5、2.02%，保水效果明顯（P<0.05）；褐藻膠寡糖脂質(zhì)體復(fù)合無(wú)磷保水劑組的蝦仁解凍失水率為-8.36%，顯著低于蒸餾水和復(fù)合磷酸鹽處理組（6.15%和-3.70%）（P<0.05），其解凍失水率與褐藻膠寡糖復(fù)合保水劑組的蝦仁相比（-7.59%），無(wú)顯著性差異（P>0.05）；褐藻膠寡糖脂質(zhì)體復(fù)合保水劑組的蝦仁蒸煮損失率為7.55%，顯著低于蒸餾水和復(fù)合磷酸鹽的處理組（30.33%和12.63%）（P<0.05），其蒸煮損失率和褐藻膠寡

6、糖復(fù)合保水劑組的蝦仁（7.31%）相比，無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　4、牛津杯抑菌實(shí)驗(yàn)表明，褐藻膠寡糖脂質(zhì)體對(duì)幾種常見(jiàn)的致病菌（沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、志賀氏菌和李斯特菌）有較好的抑制作用，且效果優(yōu)于褐藻膠寡糖。體外抗氧化的研究表明，褐藻膠寡糖脂質(zhì)體有清除DPPH自由基和羥基自由基的能力，在濃度為3000μg/mL時(shí)，清除率分別為45.78%和55.86%，相對(duì)于褐藻膠寡糖清除能力有著極顯著的差異（P<0.01）

7、。采用MTT法、乳酸脫氫酶試劑盒、CCK法和AO/PI雙染法研究褐藻膠寡糖納米脂質(zhì)體對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞抑制作用。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)褐藻膠寡糖脂質(zhì)體濃度為0.5mg/mL時(shí)，細(xì)胞活性為53.23%，且效果優(yōu)于褐藻膠寡糖（P<0.01）；乳酸脫氫酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)褐藻膠寡糖脂質(zhì)體濃度為0.5mg/mL時(shí)，LDH泄漏率為66.32%，其相對(duì)于褐藻膠寡糖組，具有極顯著差異（P<0.01）；CCK實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)褐藻膠寡糖脂質(zhì)體濃度為0.5mg/mL時(shí)