雞血清丁酰膽堿酯酶分離純化與農藥敏感性研究.pdf

1、隨著現(xiàn)代農業(yè)的發(fā)展,農藥在我國糧食、水果、蔬菜的生產中發(fā)揮著日趨重要的作用,而農藥不合理使用也導致了農產品中的農藥殘留超標,影響了人民食用安全和農產品貿易。因此,簡便、經濟、快速的農藥殘留快速檢測技術的研究和應用對于保障我國的食品安全具有重要意義。丁酰膽堿酯酶(Butyrylcholinesterases,BChE)活性受有機磷及氨基甲酸酯類農藥的特異性抑制,BChE活性變化是重要的農藥毒理學指標,可作為農藥毒性的生物標記物。
　

2、　本文以雞血清為研究對象,對雞血清BChE進行分離純化,并對其基本酶學性質進行了研究。進而以七種有機磷和六種氨基甲酸酯類農藥為抑制劑,對比研究了雞血清BChE和商品化的馬血清BChE的農藥敏感性。研究結果如下:
　　1.雞血清BChE經DEAE Sephadex A-50離子交換和Sephacryl S-200分子篩層析后,比活力由0.0628μmol/min·mg提高到2.3689μmol/min·mg,純化37.72倍,回收率

3、為31.69％。純化后的酶除去了大量雜蛋白。
　　2.雞血清BChE的Km為60.68μmol/L,碘化硫代丁酰膽堿對該酶無過量底物抑制效應,該酶最適反應pH為8.0,最適反應溫度為35℃,對毒扁豆堿敏感性高,對鹽酸多奈哌齊敏感性低。
　　3.不同純度的雞血清BChE對農藥的抑制率基本相同。
　　4.通過測定雞血清BChE和馬血清BChE對七種有機磷農藥的IC50值,可得以下結論:
　　雞血清BChE對七種有機磷

4、農藥的敏感性從強到弱依次為:速滅磷>敵百蟲>敵敵畏>磷胺>久效磷>甲拌磷≈對硫磷;雞血清BChE對甲拌磷、對硫磷極不敏感。
　　馬血清BChE對七種有機磷農藥的敏感性從強到弱依次為:速滅磷>敵百蟲>磷胺>敵敵畏>甲拌磷>久效磷>對硫磷。
　　5.通過測定雞血清BChE和馬血清BChE對六種氨基甲酸酯類農藥的IC50值,可得如下結論:
　　雞血清BChE對六種農藥的敏感性從強到弱依次為:涕滅威>滅多威>速滅威>克百威>異