周期性牽張應(yīng)力對大鼠成骨細胞的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：本實驗利用ElectroForce3200力學(xué)試驗儀搭載的BioDynamic生物反應(yīng)艙系統(tǒng)對體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞施加單軸向周期性牽張應(yīng)力，通過檢測PKCζ與p-PKCζ蛋白表達和細胞骨架蛋白的變化，觀察單軸向周期性牽張應(yīng)力對體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞的影響，深入研究成骨細胞的力學(xué)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制，為骨組織工程和臨床治療提供新的理論依據(jù)。
　　 方法：本實驗將分離提取的SD大鼠成骨細胞進行體外培養(yǎng)，將成骨細胞與彈性載體復(fù)合，通過

2、利用ElectroForce3200力學(xué)試驗儀搭載的BioDynamic生物反應(yīng)艙系統(tǒng)為體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞加載0％、1％、2％、3％、4％、5％的單軸向周期性牽張應(yīng)力應(yīng)變3小時。使用免疫印跡法(Western Blotting)和免疫熒光(Immunofluorescent)染色檢測成骨細胞PKCζ與p-PKCζ蛋白表達和F-actin細胞骨架蛋白的變化，并使用激光共聚焦顯微鏡觀察并量化細胞骨架蛋白的變化。
　　 結(jié)果：對實

3、驗各組細胞施加牽張應(yīng)力分別為形變幅度0％、1％、2％、3％、4％、5％，加載3小時，與對照組、抑制劑組相比牽張應(yīng)力可以顯著上調(diào)大鼠成骨細胞PKCζ蛋白的表達，其中在2％形變加載時對比前組細胞在受力后PKCζ蛋白的表達上調(diào)明顯。免疫熒光結(jié)果顯示，在短時間單軸向周期性牽張應(yīng)力加載后，細胞骨架感知應(yīng)力，出現(xiàn)重構(gòu)現(xiàn)象。激光共聚焦顯微鏡觀察細胞骨架示向周邊散開并重構(gòu)。
　　 結(jié)論：成骨細胞對機械牽張應(yīng)力的反應(yīng)是一個非常復(fù)雜的過程，牽張應(yīng)力

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