重金屬鎘污染對兔關節(jié)軟骨代謝及相關因子表達影響的研究.pdf

1、目的：觀察飲水型重金屬鎘中毒時，重金屬鎘在兔膝關節(jié)液及關節(jié)軟骨、滑膜組織中的含量分布情況；并分析其對兔膝關節(jié)軟骨細胞Ⅱ型膠原、蛋白聚糖、TIMP-1mRNA 以及MMP-13mRNA表達的影響，為加快對水資源重金屬污染的治理提供理論依據(jù)。
　　 方法：40只2月半齡新西蘭大白兔隨機分為兩組，每組二十只，雌雄各半，初始體重300-330g，單籠喂養(yǎng)。對照組：正常飲用水飼養(yǎng)；鎘暴露組：5mmol/L氯化鎘飲用水飼養(yǎng)，飼養(yǎng)3個月后將兔

2、子耳緣靜脈空氣栓塞處死。分別取血液、骨骼、關節(jié)軟骨、滑膜，檢測其鎘重金屬含量；觀察關節(jié)軟骨大體形態(tài)變化；于兩側股骨內髁處刮取大小約2 mm×2 mm×2mm的組織塊,電鏡觀察軟骨細胞形態(tài)；同時刮取膝關節(jié)面軟骨至凍凝管，液氮冷凍保存。
　　 提取 mRNA，并擴增，然后用實時定量熒光反轉錄聚合酶鏈式反應（ReAltime RT-PCR）
　　 法測定兔膝關節(jié)軟骨Ⅱ型膠原、蛋白聚糖、MMP-13、TIMP-1的表達量。

3、>　　 結果：
　　 1、對照組和鎘暴露組的血液、骨骼及關節(jié)軟骨中都可檢測到鎘，并各組中均以骨骼中含量最高，依次高低均為軟骨和血液。鎘暴露組中血液、骨骼及關節(jié)軟骨鎘的含量與對照組相比，均明顯增加，且差異有顯著性（P<0.05）。
　　 2、肉眼大體觀察對照組和鎘暴露組的形態(tài)未發(fā)現(xiàn)明顯變化。
　　 3、電鏡顯示鎘暴露組軟骨細胞外形和細胞核外形不規(guī)則，細胞器減少，并可見脂滴和糖原顆粒；細胞外膠原排列紊亂。