CUTL1在肝細胞癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、實驗?zāi)康模?br>　　肝細胞癌（hepatic cell cancer，簡稱HCC），是我國乃至世界常見惡性腫瘤之一，其死亡率在全世界惡性腫瘤中排名第三位，且其發(fā)病率還在逐漸上升。隨著預(yù)防、診斷、治療等技術(shù)的不斷進步，對HCC的處理水平逐漸提高，據(jù)調(diào)查顯示，在1992年-2004年間，HCC的2-4年生存率提高了兩倍。然而，總體上，HCC一年生存率仍然低于50％。
　　隨著人類對疾病的研究進入分子水平，人們發(fā)現(xiàn)許多疾病的發(fā)生存在細

2、胞分子上的變化。轉(zhuǎn)錄因子CUTL1，又被稱為CDP、cut、Cux等，均為CCAAT置換蛋白，屬于同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子家族，在進化上高度保守。經(jīng)研究表明，CUTL1在調(diào)節(jié)細胞分化、增殖及細胞周期進展等生物學(xué)過程中發(fā)揮了重要作用，且相關(guān)研究表明，CUTL1參與了結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮肌瘤、胰腺癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。本文基于此，初步研究了CUTL1的表達在肝癌及癌旁中是否有差異性，并對大樣本肝癌資料進行分析，研究了CUTL1的表達與肝癌的臨床

3、病理因素及預(yù)后的關(guān)系，探討了CUTL1對肝癌患者生存期的影響。
　　實驗方法：
　　1、收集2013年2月至2013年7月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院手術(shù)切除的36例原發(fā)性肝細胞癌癌組織及其配對的癌旁組織，組織收取后立即放入液氮罐中，并隨后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱冷凍保存。取新鮮冰凍組織行Western-blot及實時熒光定量PCR實驗，檢測兩種組織中CUTL1在mRNA及蛋白水平上的量的表達情況，并分析了mRNA及蛋白表達間的相關(guān)性。并將癌

4、組織中CUTL1蛋白量與HCC患者臨床病理資料相聯(lián)系，分析它們的相關(guān)性;
　　2、收集了中南大學(xué)湘雅醫(yī)院2007年1月至2008年1月部分肝癌患者手術(shù)切除石蠟標(biāo)本136例，全部病例均經(jīng)病理檢查證實為肝細胞癌，并在入組前進行了病理復(fù)查。對該136例標(biāo)本中的CUTL1分子進行免疫組織化學(xué)檢查，研究CUTL1蛋白在肝癌中的表達情況，并分析了CUTL1蛋白表達與肝癌臨床病理因素關(guān)系，最后研究了CUTL1陽性表達對肝癌患者無瘤生存期及總生存

5、期的影響及對肝癌患者預(yù)后的風(fēng)險性的評估。
　　實驗結(jié)果：
　　1、Western-blot及RT-PCR結(jié)果顯示，肝癌組織中CUTL1的蛋白及mRNA表達水平明顯高于癌旁組織(P＜0.05)，相關(guān)性分析顯示mRNA的表達與蛋白表達之間呈正相關(guān)。癌組織中CUTL1蛋白表達量與臨床病理資料相聯(lián)系發(fā)現(xiàn)，CUTL1的表達在腫瘤多發(fā)、腫瘤直徑大、有血管侵犯及高的Edmondson分級患者中明顯高于腫瘤單發(fā)、瘤體直徑小、無血管侵犯及低的

6、Edmondson分級的患者(P＜0.05);
　　2、免疫組化分析顯示，CUTL1蛋白表達主要存在于細胞核中。肝癌組織中的CUTL1蛋白表達量與肝癌的臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性分析示其水平與腫瘤直徑、血管侵犯及Edmondson分級明顯正相關(guān)(P＜0.05)。而與患者的年齡、性別、肝硬化與否、腫瘤數(shù)目及AFP無明顯相關(guān)(P＞0.05);
　　3、生存分析顯示CUTL1高表達肝癌患者無瘤生存期及總生存期明顯縮短(P＜0.05)，C

7、UTL1的表達與肝癌患者的預(yù)后呈負相關(guān)。Cox風(fēng)險比例分析發(fā)現(xiàn)CUTL1對肝細胞肝癌患者總生存期有影響，是獨立的風(fēng)險因素(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、在肝細胞癌組織中，CUTL1mRNA及蛋白表達明顯增加，提示CUTL1可能為一種癌基因，促進了HCC的發(fā)生發(fā)展。
　　2、進一步進行統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，CUTL1的表達在腫瘤多發(fā)、腫瘤直徑大、有血管侵犯及高的Edmondson分級患者中明顯增高，提示CUTL1可能有