P38MAPK、Bcl-2參與遠(yuǎn)端創(chuàng)作預(yù)處理的腦保護(hù)作用.pdf

1、目的:采用SD大鼠局灶性腦缺血再灌注的模型探究遠(yuǎn)端創(chuàng)傷預(yù)處理（remote preconditioning of trauma，RPCT）對腦缺血再灌注損傷的影響，并探討P38MAPK、Bcl-2在RPCT腦保護(hù)中的作用。
　　方法:實驗分為兩部分:
　　第一部分:70只雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組(n=10):(1)假手術(shù)組（sham組）:僅將大鼠的右側(cè)頸部血管分離，不進(jìn)行大腦中動脈的結(jié)扎;(2)缺血再灌注組（I/R組）:采用

2、MCAO模型建立大鼠右側(cè)局灶性腦缺血再灌注模型;(3)預(yù)處理+I/R組(RPCT組):大鼠MCAO模型建立前30min、1h、2h、4h、24h經(jīng)腹白線做一長為2cm的縱行切口，依次切開皮膚、皮下組織、脂肪、肌肉及腹膜，然后縫合。I/R組及各個RPCT組缺血90min后再灌注24h。每組大鼠自手術(shù)前3天開始每天進(jìn)行一次行為學(xué)測試，取三次評分的平均值作為術(shù)前神經(jīng)功能評分，并在再灌注后24h時進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分;用TTC法測量大鼠腦梗死容

3、積。
　　第二部分:40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=10)，分別為sham組、I/R組、1hRPCT組和24hRPCT組，每組的處理方式分別與第一部分的相應(yīng)組相同，再灌注24h時行神經(jīng)功能缺損評分，斷頭取腦，HE染色法觀察腦組織形態(tài)的變化;Nissl染色法計算存活神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量;免疫組化及Western Blot觀察并測量腦缺血半影區(qū)P38MAPK、p-P38、Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:第一部分:(1) TT

4、C染色:sham組無腦梗死現(xiàn)象;與I/R組相比，30minRPCT組腦梗死體積無明顯變化（P＞0.05）;與I/R組相比，1h、2h、4h、24hRPCT組腦梗死體積顯著縮小(P＜0.05)。(2)神經(jīng)功能缺損評分:Longa法顯示RPCT組與I/R組的神經(jīng)功能評分無顯著差異(P＞0.05); Garcia法顯示30minRPCT組與I/R組評分無差異(P＞0.05)，其余RPCT組與I/R組之間有顯著差異(P＜0.05)。第二部分:(

5、1)神經(jīng)功能缺陷評分:RPCT組與I/R組Longa法神經(jīng)功能評分無顯著性差異(P＞0.05); RPCT組Garcia神經(jīng)功能缺陷評分顯著增高（P＜0.05）。(2)HE染色:sham組腦組織神經(jīng)元形態(tài)正常;RPCT組及I/R組腦缺血核心區(qū)的神經(jīng)元數(shù)目稀少且核固縮深染，組織疏松;與I/R組相比，1hRPCT組和24hRPCT組腦缺血半影區(qū)的神經(jīng)元層次較清楚，間質(zhì)水腫減輕，細(xì)胞數(shù)目較多且形態(tài)較完整。(3)Nissl染色:sham組神經(jīng)元

6、形態(tài)正常;1hRPCT組和24hRPCT組缺血半影區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)目比I瓜組明顯增加(P＜0.05)。(4)免疫組化及Western Blot: sham組、I/R組、1hRPCT組和24hRPCT組P38MAPK蛋白表達(dá)量無顯著變化（P＞0.05）;與I/R組相比，1hRPCT組和24hRPCT組缺血半影區(qū)p-P38蛋白、Bcl-2蛋白的表達(dá)量顯著增加(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.遠(yuǎn)端創(chuàng)傷預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷