穿膜肽修飾的PLGA納米粒用于提高阿霉素抗腫瘤活性及逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的研究.pdf

1、目的:制備穿膜肽介導(dǎo)的輸送抗癌藥物阿霉素的納米給藥系統(tǒng)，探索其在逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥、及抑制耐藥腫瘤生長(zhǎng)方面的作用。制備低分子量魚精蛋白(LMWP)修飾的PLGA納米粒，負(fù)載一線抗癌藥物阿霉素;并在體內(nèi)外評(píng)價(jià)這種納米載體在治療腫瘤多藥耐藥方面的作用。
　　方法:研究了LMWP應(yīng)用于藥物載體的優(yōu)勢(shì)，合成了烷基化的LMWP多肽，通過(guò)疏水作用力采用納米沉淀法制備LMWP修飾的PLGA納米粒(LMWP/PLGA NP)，負(fù)載阿霉素(LMWP

2、/PLGA/Dox NP)。采用激光散射粒度儀對(duì)納米粒的粒徑及電位進(jìn)行分析;用透射電子顯微鏡(TEM)觀察納米粒形態(tài)及分布;用透析法測(cè)定納米粒的體外釋藥行為;使用熒光顯微鏡及流式細(xì)胞分析儀考察各實(shí)驗(yàn)組阿霉素的入胞能力;使用激光共聚焦顯微鏡分析各實(shí)驗(yàn)組阿霉素的入核能力;采用MTT法考察各實(shí)驗(yàn)組對(duì)敏感腫瘤細(xì)胞及耐藥腫瘤細(xì)胞的增殖抑制效果;采用nu/nu裸鼠耐藥乳腺癌模型考察LMWP/PLGA/Dox對(duì)多藥耐藥腫瘤的抑制效果及全身毒性。

3、>　　結(jié)果:通過(guò)單因素法優(yōu)化制備了粒徑為200nm左右的LMWP/PLGA/Dox NP。納米粒Zeta電位為27mV左右，TEM顯示納米粒呈球狀，均勻分布。納米粒體外吸附蛋白(BSA)量較少，在血清中較穩(wěn)定，48h未發(fā)現(xiàn)顆粒粒徑變化。溶血實(shí)驗(yàn)證明了納米粒較好的生物相容性，可供注射使用。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，LMWP修飾能夠顯著增強(qiáng)納米粒進(jìn)入細(xì)胞的能力，尤其體現(xiàn)在耐藥細(xì)胞上;LMWP/PLGA/Dox NP也表現(xiàn)出了較好的核靶向功能。MTT實(shí)驗(yàn)

4、證明了LMWP/PLGA/Dox NP顯著的對(duì)于腫瘤細(xì)胞（尤其是耐藥腫瘤細(xì)胞）的增殖抑制效果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，LMWP修飾能夠增強(qiáng)PLGA納米粒穿透腫瘤的能力，顯示出對(duì)多藥耐藥腫瘤較好的抑制效果;小鼠體重變化及病理切片結(jié)果證明，LMWP/PLGA/Dox NP無(wú)毒。
　　結(jié)論:本研究構(gòu)建的LMWP修飾的負(fù)載阿霉素的PLGA納米給藥系統(tǒng)在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出較好的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的效果，顯示出較好的抑制腫瘤生長(zhǎng)的能力。為腫瘤多藥耐