紅花注射液對兔脊髓缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：觀察兔脊髓缺血再灌注損傷后紅花注射液對兔后肢功能、組織病理學、脊髓組織中Caspase-3及血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及白細胞介素-8(IL-8)改變的影響，研究紅花注射液后處理對神經細胞壞死、凋亡及脂質過氧化反應的影響，探討紅花注射液后處理在脊髓缺血再灌注損傷中的保護作用及其可能機制，從而為今后的治療提供理論依據。
　　 方法：采用改良Zivin法建立脊髓缺血再灌注模型。24只新西蘭兔隨機分為3組

2、，每組8只，假手術組（C組），缺血再灌注組（I/R組），紅花注射液后處理組（S組）。假手術組不阻斷腹主動脈，僅實施麻醉及手術操作。缺血再灌注組阻斷腹主動脈40分鐘后開放灌注，紅花注射液后處理組在阻斷腹主動脈40分鐘開放灌注后經耳緣靜脈注射紅花注射液2.0ml/kg，隨后持續(xù)泵注至總量為5ml/kg，C組與I/P組用0.9％生理鹽水5ml/kg替代。術后各組分別于再灌注0小時、4小時、12小時、24小時、48小時股靜脈取血，測定血清中丙二

3、醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)以及白細胞介素-8(interleukin-8，IL-8)濃度。再灌注4小時，12小時，24小時，48小時觀察動物后肢活動并進行神經功能評分。手術各組分別于再灌注后48小時后取實驗動物L2-5段脊髓行病理學檢查，采用HE染色觀察脊髓標本的一般病理學改變，TUNEL法染色觀察脊髓標本的細胞凋亡情況，Western-blot檢測脊

4、髓組織中Caspase-3的表達。
　　 結果：⑴I/R，S組在再灌注后均有不同程度的下肢癱瘓。S組于再灌注后各觀察時間點后肢神經功能評分（改良Tarlov評分）均高于I/R組（P＜0.05，P＜0.01）。⑵組織病理學檢查（HE染色）發(fā)現再灌注48h后S組脊髓神經細胞空泡變性范圍、炎癥反應均明顯輕于I/R組，脊髓前角正常神經元計數S組均顯著高于I/R組（P＜0.05）。⑶TUNEL染色顯示凋亡神經元計數I/R組明顯多于S組，C

5、組脊髓標本中無凋亡細胞顯色。⑷Western-blot檢測脊髓組織中Caspase-3的表達發(fā)現，C組無Caspase-3表達，I/R組Caspase-3表達量明顯高于I/R組。⑸Elisa法檢測血清指標發(fā)現，I/R組與S組比較，脊髓缺血再灌注后相應時間點血清SOD活性均較低(P＜0.05)，而MDA含量均增多(P＜0.05)。⑹Elisa法檢測脊髓缺血再灌注后各個時間點血清IL-8水平發(fā)現，I/R組IL-8水平均顯著高于C組(P＜0.

6、05，P＜0.01)，而S組均明顯低于IR組（P＜0.05，P＜0.01）。
　　 結論：①紅花注射液后處理對脊髓缺血再灌注損傷具有保護作用。其保護作用主要表現在兩個方面，一是抑制神經細胞的凋亡，二是減少神經元的壞死。②紅花注射液減輕脊髓缺血再灌注引起的神經損傷，機制可能與其能減輕脊髓神經細胞的脂質過氧化反應有關。③紅花注射液抑制神經細胞凋亡的機制可能與其能夠顯著減少再灌注期間Caspase-3的表達水平有關。④紅花注射液減少神