已閱讀1頁，還剩52頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀
版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的：構建miRNA-451真核表達重組質粒及其對照重組質粒,轉染小鼠腎小球系膜細胞,研究miRNA-451對腎小球系膜細胞中誘導型一氧化氮合酶(iNOS)基因表達的影響。
方法：依據miRBase數據庫中mlnu-miR-451序列,添加酶切位點及polyT轉錄終止序列,設計兩條寡核苷酸片段,退火處理后克隆至真核表達載體pGenesil-1質粒中,經酶切鑒定及測序驗證后,構建成為miRNA-451真核表達載體(pGene
2、sil-1-miRNA-451質粒)。同時同法設計一對隨機對照單鏈寡核苷酸片斷構建成為陰性對照重組質粒(pGenesil-1-control)。將pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control質粒用lipofectamine2000分別轉染小鼠腎小球系膜細胞,經G418篩選,建立穩(wěn)定表達pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control的細胞株。采用MTT比色法檢測活細胞數并繪
3、制生長曲線；RT-PCR、Westernblot及免疫細胞化學檢測轉染前后iNOS基因蛋白質表達水平,運用生物學軟件分析圖像結果。
結果：經酶切鑒定及測序證實pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control重組質粒構建成功。與未處理的小鼠腎小球系膜細胞和穩(wěn)定表達pGenesil-1-control的細胞相比,在穩(wěn)定表達pGenesil-1-miRNA-451的小鼠腎小球系膜細胞中,細胞增殖受到
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- MiRNA-451在結直腸癌中的表達及其與多藥耐藥關系研究.pdf
- PEDVN基因重組真核質粒的構建、表達及其對Vero細胞的影響.pdf
- hTERT重組質粒的構建及其表達.pdf
- 雞甲狀旁腺激素基因真核表達質粒構建及其表達效果研究.pdf
- TPRN基因突變檢測分析及其質粒表達載體的構建.pdf
- siRNA表達載體的構建及其對MCF-7細胞hTERT基因表達抑制的研究.pdf
- miRNA-451a在不同心肌肥厚模型的表達及其對心肌肥厚的影響.pdf
- il-27亞基基因真核表達質粒的構建與表達
- insig2真核表達質粒的構建及其對脂肪代謝相關基因的影響.pdf
- siRNA表達質粒文庫的構建.pdf
- 視神經NgR mRNA的表達及其siRNA表達質粒載體的構建.pdf
- 雞降鈣素基因重組質粒的構建及其在蛋雞體內的表達研究.pdf
- siRNA真核表達載體的構建及對MSTN基因表達抑制的研究.pdf
- 人源肝癌單鏈抗體基因真核表達質粒的構建、表達.pdf
- miRNA-451對RF-6A視網膜血管內皮細胞的生物學影響.pdf
- 28491.抑制coronin1基因表達的sirna質粒載體的構建及篩選研究
- D28k鈣結合蛋白基因真核表達質粒的構建及其表達效果的研究.pdf
- 原癌基因Lmo2不同剪接方式的表達質粒的構建及表達.pdf
- 皮蠅素基因真核表達質粒的構建及其免疫特性的研究.pdf
- pGEX-4T-2-TK原核表達質粒的構建及其表達.pdf
評論
0/150
提交評論