11β-羥基類固醇脫氫酶1在肥胖形成中的作用及機(jī)制探討.pdf

1、第一部分:目的：11β-羥基類固醇脫氫酶1表達(dá)水平的變化在2型糖尿病的發(fā)病機(jī)理中起到了重要作用。中心性肥胖是2型糖尿病的高危風(fēng)險(xiǎn)因子之一，而11β-HSD1在中心性肥胖形成中的機(jī)制尚不明了。因此，在本部分研究中，首先探討中心性肥胖患者不同部位脂肪組織中11β-HSD1表達(dá)水平的變化，并分析11β-HSD1與肥胖危險(xiǎn)因素的相關(guān)性。
　　 方法：選取普外科腹部手術(shù)病人23例，以BMI值“28”為切點(diǎn)分為肥胖組（OB）
　　

2、13例及對(duì)照組（CTL）10例。術(shù)中采集患者皮下和內(nèi)臟脂肪組織，運(yùn)用RT-PCR法和Western blot法檢測(cè)11β-HSD1的表達(dá)。比較兩組患者性別、年齡、體重指數(shù)（BMI）、腰臀比（WHB）、血脂、血壓、空腹血糖（FBG）、空腹血漿胰島素(FIN)及胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）等指標(biāo)及兩種不同脂肪組織中11β-HSD1含量，并分析內(nèi)臟脂肪組織11β-HSD1mRNA水平與上述指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：RT-PCR及

3、Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，兩組內(nèi)臟脂肪組織中11β-HSD1的表達(dá)都顯著高于皮下脂肪組織，而OB組內(nèi)臟脂肪組織11β-HSD1表達(dá)水平更高；11β-HSD1在兩組皮下脂肪組織的表達(dá)無(wú)顯著差異。Pearson相關(guān)分析提示11β-HSD1mRNA水平與BMI(r=0.4952，p<0.0001)、WHR(r=0.5851，p<0.0001)、FIN(r=0.2547，p<0.01)、TC(r=0.1442，p<0.05)、TG(

4、r=0.1974，p<0.01)、LDL-C(0.1529，p<0.05)水平及HOMA-IR呈正相關(guān)(r=0.4637，p<0.0001)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(r=-0.2659，p<0.01)。多元線性回歸分析顯示，腰臀比、體重指數(shù)和胰島素抵抗指數(shù)是影響內(nèi)臟脂肪組織11β-HSD1表達(dá)的三個(gè)最為重要的因素。
　　 結(jié)論：11β-HSD1在中心性肥胖患者內(nèi)臟脂肪組織中的表達(dá)明顯增多，可能通過(guò)促進(jìn)內(nèi)臟脂肪堆積參與中心性肥胖的行

5、成。11β-HSD1在內(nèi)臟脂肪組織中的表達(dá)水平受BMI、WHR、FBG、FIN、HOMA-IR和HDL-C多重影響。其中WHR、BMI及HOMA-IR是影響內(nèi)臟脂肪中11β-HSD1表達(dá)水平的重要因素。
　　 第二部分:目的：11β-HSD1可能通過(guò)促進(jìn)內(nèi)臟脂肪堆積參與中心性肥胖的行成，且胰島素抵抗指數(shù)是影響內(nèi)臟脂肪11β-HSD1表達(dá)水平的重要因素之一。而11β-HSD1在肥胖時(shí)胰島素抵抗形成中的機(jī)制尚不明了。眾多研究結(jié)果顯示

6、，脂肪細(xì)胞內(nèi)分泌功能紊亂、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞內(nèi)胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路異常參與了胰島素抵抗的病理生理過(guò)程。本部分實(shí)驗(yàn)中，主要研究11β-HSD1抑制劑對(duì)肥胖時(shí)脂肪細(xì)胞分泌功能及胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響，從而探討11β-HSD1參與肥胖時(shí)胰島素抵抗的可能機(jī)制。
　　 方法：將雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組，對(duì)照組（CTL）以普通飲食喂養(yǎng)，肥胖組（OB）及11β-HSD1選擇性抑制劑-BVT.2733組（BVT）以高脂飲食喂養(yǎng)12周之后，B

7、VT組給予BVT.2733 100mg/kg/d進(jìn)行灌胃4周。腹腔內(nèi)注射葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各點(diǎn)血糖及胰島素水平，H-E染色觀察三組大鼠脂肪細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目變化，生化法和ELISA法檢測(cè)血漿葡萄糖及胰島素水平，ELISA法檢測(cè)脂肪細(xì)胞分泌因子脂聯(lián)素、瘦素、抵抗素、TNF-α、IL-6水平、Western blots法分析IRS-1、IRS-2、PI3K、GLU4和PPAR-γ在大鼠網(wǎng)膜脂肪組織中的蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：給予高脂

8、喂養(yǎng)大鼠12周后，同對(duì)照組比較，肥胖組體重明顯增加，血漿胰島素、胰島素抵抗程度、TNF-α、IL-6水平明顯升高，血清脂聯(lián)素水平下降，瘦素、抵抗素水平顯著升高，脂肪細(xì)胞體積明顯增大，Western blot結(jié)果顯示OB組網(wǎng)膜脂肪組織IRS-1、IRS-2、PI3K、GLU4蛋白表達(dá)水平明顯降低，PPAR-γ表達(dá)增高。通過(guò)BVT.2733干預(yù)4周后，同肥胖組比較，BVT組大鼠體重降低，脂肪細(xì)胞體積減小，空腹血漿胰島素及胰島素抵抗程度明顯下

9、降，血清脂聯(lián)素水平上升，網(wǎng)膜脂肪組織IRS-1、IRS-2、PI3K、GLU4蛋白表達(dá)水平上升，PPAR-γ表達(dá)減少，但瘦素及抵抗素水平無(wú)明顯變化。葡萄糖耐量試驗(yàn)顯示三組大鼠空腹血糖并無(wú)明顯差異，但肥胖組負(fù)荷后各時(shí)間點(diǎn)血糖值均顯著增高。給予抑制劑后BVT組負(fù)荷后15min血糖值較肥胖組有明顯下降，但其它各點(diǎn)血糖值的改變并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。肥胖組大鼠各時(shí)間點(diǎn)胰島素水平均明顯高于對(duì)照組，經(jīng)抑制劑干預(yù)后各點(diǎn)胰島素水平顯著下降。
　　 結(jié)論