真菌發(fā)酵麻瘋樹(shù)廢棄餅粕產(chǎn)蛋白酶的研究.pdf

1、隨著世界石油資源的枯竭,種植麻瘋樹(shù)以提煉生物柴油已經(jīng)成為解決資源短缺的有效途徑之一。麻瘋樹(shù)的廣泛種植和生物柴油的批量生產(chǎn)將會(huì)產(chǎn)生大量的餅粕,雖然其含有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,但由于其含有佛波醇和核糖體失活蛋白等毒性成分而沒(méi)有得到很好利用。如果將餅粕直接排放,不僅會(huì)造成資源的浪費(fèi),而且會(huì)污染周?chē)沫h(huán)境。因此,如何利用麻瘋樹(shù)餅粕是一個(gè)迫切需要解決的問(wèn)題。與麻瘋樹(shù)餅粕相似的菜籽餅、棉籽餅、蓖麻籽餅粕,已有研究人員對(duì)其微生物脫毒利用展開(kāi)了研究。脫毒后的

2、餅粕可以作為畜禽的飼料,得到更好地利用。
　　本文以黑曲霉和黃曲霉作為發(fā)酵菌株,以提油后的麻瘋樹(shù)廢棄餅粕作為培養(yǎng)基,采用固態(tài)發(fā)酵方式生產(chǎn)蛋白酶。
　　對(duì)黑曲霉及黃曲霉菌株產(chǎn)蛋白酶的工藝條件進(jìn)行研究,黑曲霉發(fā)酵培養(yǎng)條件為水料比50％,添加5％葡萄糖,發(fā)酵4天,產(chǎn)酶最好。黃曲霉發(fā)酵培養(yǎng)條件為水料比50％,添加10％乳糖,發(fā)酵5天,產(chǎn)酶最佳。同時(shí)對(duì)液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)蛋白酶條件進(jìn)行了初步探索。對(duì)黑曲霉及黃曲霉菌株產(chǎn)蛋白酶進(jìn)行初步純化,通過(guò)4

3、0％的硫酸銨沉淀雜蛋白再用70％硫酸銨沉淀蛋白酶,然后用透析袋進(jìn)一步純化濃縮蛋白酶。然后對(duì)蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)作了研究。黑曲霉所產(chǎn)蛋白酶最適催化溫度為50℃,最適pH值為4.0,最大反應(yīng)速度Vmax=18.05μg/min,米氏常數(shù)Km=2.23 mg/ml。有機(jī)溶劑對(duì)其酶活的激活作用則較為明顯,15％的甲醇或10％乙醇分別可以提升酶活31％和24％。各種金屬離子中Ca2+的促進(jìn)作用最為明顯可以提升酶活28％,而Na+和Hg2+則能夠抑制高