HMGB1在內(nèi)毒素大鼠急性肺損傷肺血管重構(gòu)中的作用機制研究.pdf

1、目的:
　　 探討HMGB1在脂多糖誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷肺血管重構(gòu)中的作用機制，為內(nèi)毒素急性肺損傷的臨床治療提供進一步的理論基礎(chǔ)。
　　 材料與方法:
　　 健康雄性成年wistar大鼠30只，體重160-220g，隨機分為3組，每組10只，分別為:對照組（C組）、LPS模型組（L組）、HMGB1中和抗體處理組（H組）。C組大鼠尾靜脈恒速注射0.9％NaCl(1mg/kg)、L組大鼠尾靜脈注射同等劑量LPS，均在

2、1小時注射完畢。H組大鼠在注射同等劑量LPS后12h/24h/48h分別尾靜脈注射HMGB1中和抗體(2mg/kg)。各組大鼠均在第一次注射藥物72h后處死。應(yīng)用HE組織染色觀察各組大鼠與支氣管伴行的肺小動脈中膜厚度及面積改變，組織化學(xué)染色法半定量每組大鼠肺小動脈中膜平滑肌細胞PCNA、bax、bcl-2的表達情況，RT-PCR法定量測定每組大鼠肺組織HMGB1、bax、bcl-2mRNA的表達，western-blot法測定每組大鼠肺

3、組織HMGB1、bax、bcl-2蛋白含量變化。
　　 結(jié)果:
　　 (1)組織病理學(xué)染色顯示，與C組、H組相比，L組的肺小動脈中膜厚度百分比明顯增加(P＜0.05);H組與C組比較，肺小動脈中膜厚度百分比無差異(P＞0.05)。(2)組織化學(xué)染色法顯示，PCNA、Bcl-2、Bax在C組、L組、H組肺小動脈中膜均有表達，棕黃色顆粒為陽性表達。(3)L組的肺小動脈中膜PASMC增殖細胞核抗原(PCNA)陽性細胞數(shù)增加，與

4、C組相比，增殖指數(shù)顯著增加(P＜0.05);H組較L組明顯降低(P＜0.05);C組與L組相比無明顯差異(P＞0.05)。(4)實時熒光定量PCR測定得出，L組HMGB1mRNA含量較C組、H組比較顯著升(P＜0.05);L組BaxmRNA的表達相較于C組明顯下降(P＜0.05);經(jīng)抗體處理后，H組BaxmRNA的表達相較于L組明顯增加(P＜0.05);與C組、H組比較，L組Bcl-2mRNA的表達明顯增加(P＜0.05);(5)蛋白印

5、跡法表明，Bax蛋白表達在C組及H組均高于L組(P＜0.05);Bcl-2蛋白表達在C組及H組均低于L組(P＜0.05);HMGB1蛋白含量在L組顯著高于C組及C組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、LPS誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷過程中存在小動脈構(gòu)型重建;
　　 2、HMGB1可能通過下調(diào)Bax基因表達，上調(diào)Bcl-2基因的表達，誘導(dǎo)肺小動脈上PASMC的增殖，促進內(nèi)毒素急性肺損傷肺血管重構(gòu);