姜黃素逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥性的體外實(shí)驗(yàn).pdf

1、目的： 原發(fā)性肝癌是當(dāng)今世界上最常見(jiàn)、惡性程度最高的腫瘤之一，目前肝癌治療首選根治性切除手術(shù)，局部或全身化療仍是治療肝癌一種常用手段，但肝癌化療失敗率高，主要原因是腫瘤對(duì)化療藥物存在在耐藥性。姜黃素是從姜科植物中藥姜黃的地下根莖中分離出來(lái)的主要活性物質(zhì)，具有廣泛的預(yù)防和治療腫瘤的作用，有報(bào)道發(fā)現(xiàn)姜黃素可作為腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑。本研究采用姜黃素作用于人肝細(xì)胞癌多藥耐藥株HepG2/ADM，觀測(cè)其有無(wú)逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥性的作用。 方法

2、： 通過(guò)培養(yǎng)液中阿霉素濃度梯度遞增法，長(zhǎng)期篩選建立人肝癌多藥耐藥細(xì)胞系HepG2/ADM，采用MTT法檢測(cè)其對(duì)6種抗癌藥物的耐藥性，免疫組化法檢測(cè)HepG2/ADM細(xì)胞與親本細(xì)胞P-gp的表達(dá)。鏡下觀察和MTT法檢測(cè)姜黃素對(duì)HepG2/ADM細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用。高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定加用姜黃素后HepG2/ADM細(xì)胞內(nèi)ADM含量。 結(jié)果： HepG2/ADM細(xì)胞與HepG2細(xì)胞兩者生長(zhǎng)曲線形態(tài)相似，He

3、pG2/ADM細(xì)胞倍增時(shí)間較HepG2細(xì)胞輕度延長(zhǎng)。通過(guò)MTT法檢測(cè)6種抗癌藥物對(duì)兩組細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，結(jié)果顯示在化療藥物作用48小時(shí)后，HepG2/ADM細(xì)胞的生存率均明顯高于HepG2細(xì)胞，觀察耐藥倍數(shù)發(fā)現(xiàn)HepG2/ADM細(xì)胞不僅對(duì)原誘導(dǎo)藥物ADM產(chǎn)生了耐藥，而且對(duì)另外四種藥物也出現(xiàn)交叉耐藥，即產(chǎn)生了多藥耐藥性。免疫組化法檢測(cè)兩組細(xì)胞P-gp的表達(dá)水平，HepG2/ADM細(xì)胞與HepG2細(xì)胞相比P-gp表達(dá)陽(yáng)性染色率明顯增加（P<