星型多臂嵌段共聚物納米膠束給藥體系的研究.pdf

1、許多在體外實驗中證明對癌細胞都具有良好抑制性的抗癌藥物，在體內(nèi)實驗和臨床應(yīng)用中卻治療效果不顯著，且藥物毒性大。對藥物載體的研究幫助藥物準確高效的送達病癥細胞，減少藥物對人體正常組織和細胞的毒副作用。納米膠束作為藥物載體，可用于疏水性抗癌藥物的靶向傳遞。本課題合成了星型4臂端氨基PLGA-PEG嵌段共聚物[4s-(PLGA-PEG-NH2)]，并用其制備包載疏水性抗癌藥物阿霉素(DOX)的納米膠束；考察了合成材料的理化性質(zhì)，膠束形態(tài)學特征

2、；通過體外細胞實驗評價和比較人宮頸癌HeLa細胞對載阿霉素星型4臂端氨基PLGA-PEG納米膠束的攝取能力，用相同親疏水鏈段長度的線性PLGA-PEG-PLGA(L-PLGA-PEG-PLGA)構(gòu)成的納米膠束作為對照，比較HeLa細胞對膠束載體的攝取能力，和兩種膠束載體對HeLa細胞的殺傷性，結(jié)果顯示4臂端氨基PLGA-PEG納米膠束更容易被HeLa細胞攝取，對HeLa細胞的殺傷能力更強。具體內(nèi)容分為以下三個部分：
　　 一、星

3、型4臂PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物的合成與表征
　　 兩步法合成星型4臂端胺基PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物：首先采用本體熔融聚合法合成4臂PLGA鏈段(4s-PLGA)，再采用DCC縮合法合成星型4臂端氨基PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物。并通過核磁共振(1HNMR)和凝膠滲透色譜(GPC)對新合成得到的聚合物進行化學組成、結(jié)構(gòu)和相對分子質(zhì)量的表征。結(jié)果表明，所合成的聚合物符合設(shè)計的星型4臂結(jié)構(gòu)，嵌段共聚物中PLGA和P

4、EG鏈段的自身結(jié)構(gòu)沒有改變。
　　 二、載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的制備與表征
　　 采用乳液-溶劑揮發(fā)法制備阿霉素聚合物納米膠束。鹽酸阿霉素經(jīng)三乙胺脫鹽處理后為疏水性。先將阿霉素和星型4臂端氨基PLGA-PEG嵌段共聚物制成O/W單乳化體系，形成穩(wěn)定的乳液后，通過連續(xù)攪拌的方式除去有機溶劑。離心干燥后得到載阿霉素星型4臂PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物納米膠束[DOX-loaded4s-(PLG

5、A-PEG-NH2)]。同時，用相同方法，將由相同親疏水鏈段長度構(gòu)成的線性PLGA-PEG-PLGA兩親性嵌段共聚物制備為載阿霉素納米膠束[DOX-loadedL-(PLGA-PEG-PLGA)]作為對照。通過透射電鏡(TEM)考察并對比其形態(tài)特征；并對兩種膠束粒子的粒徑，zeta電位，載藥量和藥物包封率分別進行了表征。結(jié)果表明，所制備的星型聚合物膠束粒子粒徑分布在(120±4.1)nm，zeta電位分布于(-17.6±0.87)mv，

6、載藥量（7.49±0.3）％，藥物包封率（75.2±3.2）%；線性聚合物膠束粒子粒徑分布在(91.28±2.3)nm，zeta電位分布于(-13.1±1.12)mv，載藥量（5.54±0.2）%，藥物包封率（57.3±2.8）%。
　　 三、載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的體外抗腫瘤作用
　　 采用HeLa細胞在體外評價載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的抗腫瘤作用。HeLa細胞與星

7、型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束、線性PLGA-PEG-PLGA納米膠束、和游離的阿霉素藥物分子，分別共同孵育6h和12h。細胞攝取實驗通過激光共聚焦顯微鏡觀察，結(jié)果顯示HeLa細胞對星型聚合物納米膠束的攝取明顯高于對線性聚合物納米膠束和游離DOX藥物分子的攝取。體外抗腫瘤實驗表明，星型4臂聚合物納米膠束和由相同PLGA、PEG鏈段構(gòu)成的線性聚合物納米膠束相比，前者與對HeLa腫瘤細胞的殺傷作用更強。
　　 綜上所述，本