蛋白質(zhì)組學篩選動脈硬化閉塞癥相關蛋白的研究.pdf

1、動脈粥樣硬化閉塞癥(Atherosclerosis Obliterans,ASO)是全身動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)在外周動脈中的表現(xiàn)，是血管外科的常見病之一。以血管壁內(nèi)脂質(zhì)異常沉積、炎癥細胞浸潤、泡沫細胞形成、平滑肌細胞增殖和遷移、粥樣斑塊形成為病理特征，是基因和環(huán)境相互作用的結果，但確切的發(fā)病機制尚未明確。
　　 基因是遺傳信息的攜帶者，但是真正體現(xiàn)生物體功能的是蛋白質(zhì)，并且基因組與蛋白質(zhì)組之間是不一

2、致的，因此，應用蛋白質(zhì)組學的方法直接研究ASO的蛋白表達情況，可能更有助于揭示ASO的發(fā)病機制。隨著蛋白質(zhì)組學及相關分子生物學技術的發(fā)展，國內(nèi)外學者已經(jīng)對動脈粥樣硬化的發(fā)病機制開始了蛋白質(zhì)組學的研究。但尚未檢索到有關人ASO病變股動脈的蛋白質(zhì)組學研究。
　　 研究目的：研究ASO病變股動脈蛋白質(zhì)組表達情況，探討病變股動脈表達的差異蛋白質(zhì)及其在發(fā)病機制中的作用，并對差異蛋白質(zhì)進行驗證。
　　 方法：首先，選取人ASO股動脈

3、8例及正常股動脈5例，行HE染色，以提供形態(tài)學依據(jù)；然后，提取組織蛋白質(zhì)，行雙向凝膠電泳分離，質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫查詢，獲得差異蛋白質(zhì)信息。最后，運用免疫組化和western-blot對差異蛋白質(zhì)進行驗證。
　　 結果：ASO組股動脈符合AS病理特征，正常組股動脈無病理變化；成功建立ASO和正常股動脈雙向電泳圖譜，并篩選出表達量差異大于2倍以上的蛋白質(zhì)點53個，27個上調(diào)，26個下調(diào)，質(zhì)譜鑒定出24種蛋白質(zhì)，主要與炎癥、免疫、氧化應