孤兒核受體Nur77在低剪切應力誘導的小鼠頸動脈血管重構中的作用及機制.pdf

1、目的：
　　探討在低剪切應力誘導小鼠頸動脈血管重構過程中，孤兒核受體Nur77的表達變化及其對血管重構的影響和作用機制。
　　方法：
　　1）6-8周齡雄性C57BL/6小鼠隨機分為假手術組和血管重構模型組，部分結扎左側頸總動脈分支方法構建低剪切應力誘導血管重構模型。術后4周取材，蘇木素-伊紅（HE）染色分析頸總動脈內(nèi)中膜面積及厚度，Verhoeff-Van Gieson彈性纖維染色標記血管彈力板，天狼猩紅染色標記膠原

2、，免疫熒光染色標記Nur77，DHE探針檢測血管局部ROS水平。
　　2）原代培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細胞，給予ox-LDL、7-KC、9-HODE、13-HODE、H2O2及其抑制劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）刺激，western blotting和real time PCR方法檢測Nur77表達。
　　3）6-8周雄性Nur77-/-小鼠和C57BL/6小鼠造膜4周后取材，如方法1）檢測血管重構相關指標，同時免疫熒光染色方法檢測

3、MMP9和PCNA表達，原位末端標記（TUNEL）法檢測血管細胞凋亡水平。
　　結果：
　　1）模型組小鼠左頸動脈內(nèi)中膜面積及厚度較假手術組顯著增加（p＜0.05），彈力板多處斷裂，排列紊亂，局部ROS水平升高（p＜0.05）伴Nur77蛋白表達顯著增加（p＜0.05），上調(diào)的Nur77蛋白主要分布在血管平滑肌細胞（VSMC）中；
　　2）體外給予ox-LDL、7-KC、9-HODE、13-HODE、H2O2等氧化應激

4、刺激后，大鼠VSMCNur77的mRNA及蛋白水平顯著增高，H2O2抑制劑NAC能夠逆轉上述效應；
　　3）造模4w后，Nur77-/-小鼠組左頸動脈內(nèi)中膜面積及厚度較顯著高于C57BL/6小鼠組（p＜0.05），彈力板斷裂增多，排列紊亂，局部MMP9、PCNA高表達（p＜0.05），但兩組血管細胞凋亡水平無差別（p>0.05）。
　　結論：
　　孤兒核受體Nur77在低剪切力誘導小鼠頸動脈血管重構過程中表達上調(diào)，上調(diào)