抑制枯否細(xì)胞對急性壞死性胰腺炎的影響.pdf

1、目的：研究抑制枯否細(xì)胞對急性壞死性胰腺炎的影響及其機(jī)制。 方法：將健康雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為三組：假手術(shù)組(SO組)、急性壞死性腴腺炎組(SAP組)及三氯化釓組(GdCl3組)。SAP組以膽總管內(nèi)逆行注射5％?；悄懰徕c(0.1ml/100g)的方法制成SAP模型；GdCl3組于術(shù)前1天經(jīng)鼠尾靜脈注射GdCl3溶液(20mg/kg，溶于無菌生理鹽水中配制)，其余操作同SAP組；SO組開腹后牽拉翻動胰腺及十二指腸后即縫合關(guān)腹。

2、各組動物均于術(shù)后24小時處死，實(shí)驗(yàn)分三部分進(jìn)行：1、實(shí)驗(yàn)一：(1)檢測血中內(nèi)毒素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、淀粉酶(AMS)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及肝組織勻漿腫瘤壞死因子(TNF-α)含量；(2)HE染色，光鏡下觀察胰腺及肝臟病理改變；(3)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行肝細(xì)胞DNA含量測定，觀察細(xì)胞有無凋亡并計(jì)算凋亡率。2、實(shí)驗(yàn)二在處死動物前各組經(jīng)鼠尾靜脈注射用生理鹽水1∶3稀釋的印度墨汁(0.25ml/100

3、g)。(1)計(jì)算吞噬指數(shù)k及其校正值a；(2)HE染色，高倍鏡下觀察KC并計(jì)數(shù)。3、實(shí)驗(yàn)三：檢測血中內(nèi)毒素、內(nèi)皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)含量并計(jì)算ET-1/NO及TXB2/6-Keto-PGF1α。 結(jié)果：1、(1)SAP組與SO組相比，血中內(nèi)毒素、ALT、AMS、TNF-α、NO、MDA及肝組織勻漿TNF-α水平均顯著升高(p＜0.01)；Gd

4、Cl3組與SAP組相比，血中內(nèi)毒素水平顯著升高(p＜0.01)，血中ALT、TNF-α、NO、MDA及肝組織勻漿TNF-α水平均顯著降低(p值分別＜0.01、0.01、0.05、0.01及0.01)；血中AMS水平無明顯差異。(2)SO組大鼠胰腺小葉結(jié)構(gòu)正常，腺泡及導(dǎo)管結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常；SAP組大鼠胰腺出現(xiàn)片狀壞死，腺泡結(jié)構(gòu)破壞，伴有出血和大量炎性細(xì)胞浸潤，血管擴(kuò)張、淤血，小葉結(jié)構(gòu)紊亂，殘余的胰腺組織腺泡細(xì)胞有水腫，符合急性出血壞

5、死性胰腺炎表現(xiàn)；GdCl3組與SAP組變化相似。(3)SO組大鼠肝臟肝索及匯管區(qū)結(jié)構(gòu)正常，細(xì)胞排列整齊；SAP組大鼠的肝臟淤血明顯，中央靜脈擴(kuò)張，有大量紅細(xì)胞，肝竇水腫，肝細(xì)胞間的距離增寬，肝細(xì)胞腫脹變性，有點(diǎn)狀壞死及嗜酸性變，有少量炎性細(xì)胞浸潤；GdCl3組肝臟亦為肝細(xì)胞腫脹變性，淤血表現(xiàn)，但情況明顯好于SAP組。(4)流式細(xì)胞結(jié)果提示SAP組大鼠肝細(xì)胞發(fā)生凋亡。SAP組與SO組相比，肝細(xì)胞凋亡率顯著升高(p＜0.01)；GdCl3組

6、與SAP組相比，肝細(xì)胞凋亡率顯著降低(p＜0.01)。2、SAP組與SO組相比，KC的數(shù)目和吞噬指數(shù)k校正值a無明顯差異；GdCl3組與SAP組相比，KC的數(shù)目和吞噬指數(shù)k校正值a均顯著降低(p＜0.01)。3、SAP組與SO組相比血中內(nèi)毒素、ET-1、NO、TXB2及ET-1/NO、TXB2/6-Keto-PGF1α水平均顯著升高(p＜0.01)；GdCl3組與SAP組相比，血中內(nèi)毒素水平顯著升高(p＜0.01)，血中ET-1、NO、