大鼠腦缺血再灌注和丁苯酞干預后海馬組織中Smad4的表達變化及Smad4在高爾基體定位的研究.pdf

1、目的:觀察大鼠腦缺血再灌注損傷以及丁苯酞干預后Smad4的表達變化,以及Smad4亞細胞定位,探討丁苯酞的神經(jīng)保護機制。
　　方法:(1)分組:健康SD大鼠50只,隨機分為正常對照組、假手術組、缺血再灌注組(I/R)、丁苯酞干預組(NI/R);觀察在腦缺血再灌注后6h、1d、3d、7d的各相應時間點Smad4的表達:(2)模型制作:缺血再灌注組大鼠予以夾閉雙側頸總動脈15min以及硝普鈉控制低血壓后再灌注;假手術組大鼠僅分離雙側頸

2、總動脈不予以夾閉;丁苯酞干預組在實驗前兩天開始丁苯酞灌胃(80mg/kg,BID)直到處死,余步驟同缺血再灌注組;(3)HE染色觀察病理變化;(4)免疫組織化學染色觀察Smad4表達變化。(5)采用免疫熒光共聚焦的方法觀察Smad4在額葉皮質細胞高爾基體的定位情況。全部數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析。
　　結果:(1)HE染色:1.大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞減少,神經(jīng)元變性、壞死,這種改變在缺血再灌注后3天及7天最為明顯。丁

3、苯酞干預后,干預組中存活的海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞較非干預組明顯增加。(2)免疫組化:Smad4在神經(jīng)細胞胞核及胞質中均有陽性表達。正常對照組與假手術組大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元中Smad4陽性細胞表達較少,Smad4在缺血再灌注損傷后在各時間點表達顯著上調,1d時明顯升高,在3d和7d時達到高峰,與對照組比較,有顯著性差異(P＜0.05)。丁苯酞干預組Smad4表達在各相應時間點較對照組表達上調,趨勢與缺血再灌注組一致,陽性率明顯低于缺血再灌