TSP-1、PDGF-B在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上的表達變化及曲安奈德的干預作用.pdf

1、糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病患者的嚴重并發(fā)癥之一，是導致失明的重要原因，但DR的發(fā)病機制仍在探討中。從DR的成因血流動態(tài)異?？?，持續(xù)的高血糖狀態(tài)、異常的血小板聚集和凝集不僅是引起毛細血管閉塞的重要因素，而且是促成視網(wǎng)膜缺血缺氧和眼內(nèi)新生血管形成的主要病理生理基礎。PDGF-B與TSP-1均由血小板釋放，TSP-1已被公認為是一種有效的內(nèi)源性血管生成抑制因子，PDGF-B廣泛存在于發(fā)育中的血管，能夠促進微血管周細胞生長，保持微血管的正

2、常功能。近年來，國內(nèi)(外)在DR成因中有關血流動力學方面關于血小板在DR晚期的研究比較多，而對早期的研究相對比較少。相關的研究表明，TSP-1、PDGF-B與新生血管的形成密切相關。曲安奈德是一種糖皮質(zhì)激素，近些年來，廣泛應用于眼科，但其對早期DR的治療作用研究相對不多。
　　 本實驗擬建立糖尿病眼動物模型，觀察早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上TSP-1(血小板反應蛋白-1)、PDGF-B(血小板源性生長因子-B)的表達變化及其相互關系，

3、并探討曲安奈德玻璃體腔注射在不同時期對其變化的干預作用。
　　 材料與方法：選7周齡、健康、清潔級Wistar大鼠40只，體重150～160g，排除先天性近視及其它眼疾，隨機分兩組，每組20只，共40只，標準飼料飼養(yǎng)適應1周后，STZ誘導建立糖尿病大鼠模型。成模后，每周測血糖1次，將中間死亡大鼠及血糖恢復鼠棄除。其中Ⅰ組成模飼養(yǎng)4周后，實驗眼玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德液5ul(ⅠA)，對側(cè)眼注射生理鹽水5ul作為對照(ⅠB)，觀察1

4、周；Ⅱ組成模飼養(yǎng)6周后，實驗眼玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德液5ul(ⅡA)，對側(cè)眼注射生理鹽水5ul作為對照(ⅡB)，也觀察1周；在此過程中感染眼內(nèi)炎者大鼠均棄除，實驗結(jié)束后，分別處死Ⅰ組和Ⅱ組大鼠，取眼球行視網(wǎng)膜切片HE染色、免疫組織化學染色，通過與電腦相連的Biosens Digital Imaging system分析系統(tǒng)對圖像中陽性反應部位進行陽性平均灰度值分析，用陽性平均灰度值來表示免疫反應表達程度。陽性平均灰度值的高低與陽性表達的

5、強弱成反比。
　　 結(jié)果：免疫組化染色
　　 TSP-1在視網(wǎng)膜上的表達：陽性細胞表現(xiàn)為胞漿著色呈棕黃色或黃色，主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層和內(nèi)核層。陽性平均灰度值比較：ⅡA組與ⅠA組、ⅡA組與ⅡB組相比明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；ⅡB與ⅠB組、ⅠA組與ⅠB組相比無統(tǒng)計學意義。
　　 PDGF-B在視網(wǎng)膜上的表達：陽性細胞表現(xiàn)為胞漿著色呈棕黃色或黃色，主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層和內(nèi)核層。PDGF-B

6、陽性平均灰度值比較：ⅠA組與ⅠB組、ⅡA組與ⅡB組相比明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；ⅡA組與ⅠA組、ⅡB與ⅠB組相比無統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.STZ誘導成功建立糖尿病大鼠模型；
　　 2.在早期DR階段，曲安奈德應用能影響TSP-1在DR上的表達，推測TSP-1在早期即參與影響DR的發(fā)生；
　　 3.在早期階段，曲安奈德治療能促進TSP-1和PDGF-B在糖尿病視網(wǎng)膜上的表達，