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文檔簡介
1、第一部分鼠外周血內皮祖細胞體外培養(yǎng)與鑒定 目的:探討鼠外周血來源的血管內皮祖細胞(EPCs)體外培養(yǎng)及鑒定的方法。 方法:從大鼠心臟采集外周血,以密度梯度離心法分離單個核細胞(MNC),置于ECM-2培養(yǎng)基中培養(yǎng)。用Dil標記的乙?;兔芏戎鞍祝―il-acLDL)攝取試驗和FITC標記的荊豆凝集素(FITC-UEA-1)結合試驗,免疫熒光法檢測其Dil-acLDL、FITC-UEA-1的表達。 結果:從大鼠外
2、周血MNC中可成功地培養(yǎng)出EPCs。培養(yǎng)獲得的EPCs可吞噬acLDL并與UEA-1相結合,其表型為Dil-acLDL+、FITC-UEA-1+。 結論:用密度梯度離心法從大鼠外周血MNC中可成功地培養(yǎng)出EPCs。 第二部分內皮祖細胞移植對大鼠心肌梗死后缺血心肌血管再生及心功能的影響 目的:探討大鼠內皮祖細胞(EPCs)移植對大鼠心肌梗死后血管再生及對心功能的影響。 方法:分離培養(yǎng)大鼠EPCs,免疫熒光法
3、檢測其Dil-acLDL、FITC-UEA-1的表達。將Wistar大鼠冠狀動脈左前降支結扎復制急性心肌梗死模型后,在梗死心肌處植入Brdu標記的EPCs(實驗組)及EBM-2培養(yǎng)液(對照組)。另設假手術組15只為正常對照。移植后4周,心臟超聲檢查心功能,并對梗死區(qū)心肌組織進行移植細胞形態(tài)學檢查及毛細血管密度測定。 結果:培養(yǎng)獲得EPCs,其表型為Dil-acLDL+、FITC-UEA-1+。植入梗死區(qū)的EPCs可以分化為血管內
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