中藥對(duì)卵清蛋白經(jīng)皮致敏誘發(fā)BALB-c小鼠異位性皮炎病變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:異位性皮炎(Atopic Dermatitis，AD)是一種反復(fù)發(fā)作的慢性瘙癢性皮膚病，并可伴發(fā)嚴(yán)重的并發(fā)癥，對(duì)患者生活質(zhì)量影響大，但治療十分困難，所以長(zhǎng)期以來(lái)AD一直是國(guó)內(nèi)外皮膚科的研究熱點(diǎn)。 異位性皮炎是一種Th1/Th2細(xì)胞亞群失衡的炎癥性皮膚病，環(huán)境中的變應(yīng)原在AD的發(fā)生與發(fā)展中起重要的作用。 復(fù)方茯苓湯是按照中醫(yī)治療濕疹的治療原則，由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)篩試具有可能對(duì)Th2和Th1兩個(gè)細(xì)胞亞群均有作用的中藥方劑。本文

2、利用卵清蛋白(OVA)經(jīng)皮致敏誘發(fā)BALB/c小鼠異位性皮炎病變的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，進(jìn)一步研究復(fù)方茯苓湯中單味中藥的抗變態(tài)反應(yīng)及對(duì)細(xì)胞因子的作用，從而探討AD的發(fā)病機(jī)制，為開發(fā)中藥治療AD奠定基礎(chǔ)。 方法:170只BALB/c健康雌性小鼠(體重25～30g)隨機(jī)分為17組，每組10只，分別為賽庚啶、浮萍、梔子、澤瀉、黃連、蟬蛻、茯苓、赤芍、荊芥、黃柏、甘草、蒼術(shù)、防風(fēng)、當(dāng)歸、雙花、生理鹽水組和氫化可的松組。在實(shí)驗(yàn)前一天用電剃刀在小鼠

3、腹部去毛，面積約3 cmz，實(shí)驗(yàn)時(shí)于去毛處給予1 00mg／ml卵清蛋白(OVA)溶液20μl外涂，每日1次，連續(xù)7天致敏。每組10只BALB/c小鼠，均早、晚每日2次經(jīng)口灌飼藥物。第二周、第三周正常飼養(yǎng)動(dòng)物。第四周：重復(fù)第一周實(shí)驗(yàn)步驟，并于第七日誘發(fā)后24小時(shí)處死動(dòng)物，取血及斑貼部皮膚標(biāo)本。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中IgE、IL-2、IL-4、IFN-γ水平。將致敏皮膚組織塊制成常規(guī)HE染色切片，在光鏡下用網(wǎng)形目鏡測(cè)微

4、尺以單盲法計(jì)數(shù)每mm2炎癥細(xì)胞。 結(jié)果: 1．中藥對(duì)小鼠異位性皮炎動(dòng)物模型血清IgE水平的影響：與生理鹽水組相比，雙花組血清IgE水平明顯降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P≤0.0l或P≤0.001)；黃連組、蟬蛻組、茯苓組、赤芍組、防風(fēng)組血清IgE水平降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.05)； 2.根據(jù)小鼠血清IgE水平，選取中藥黃連、蟬蛻、茯苓、赤芍、防風(fēng)、雙花檢測(cè)血清1L-2，IL-4和IFN-γ水平。結(jié)果顯示與生

5、理鹽水組相比，蟬蛻組、茯苓組、防風(fēng)組、雙花組血清IL-2水平升高，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.05)；蟬蛻組、茯苓組、赤芍組、防風(fēng)組、雙花組血清IL-4水平降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.05)；茯苓組、赤芍組、雙花組血清IFN-γ水平明顯升高，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P≤0.01或P≤0.001)：黃連組、防風(fēng)組血清IFN-γ水平升高，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.05)： 3.中藥對(duì)小鼠異位性皮炎動(dòng)物模型皮損中炎癥細(xì)胞的影響：結(jié)果顯示與生

6、理鹽水組相比，浮萍組小鼠皮損中炎癥細(xì)胞數(shù)明顯降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P≤0.01或P≤0.001)；黃連組、茯苓組、赤芍組、防風(fēng)組、雙花組小鼠皮損中炎癥細(xì)胞數(shù)降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.05)。 討論:在小鼠異位性皮炎動(dòng)物模型中，中藥蟬蛻、防風(fēng)、黃連、雙花、茯苓均可抑制血清IgE。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步監(jiān)測(cè)了小鼠異位性皮炎動(dòng)物模型血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平，結(jié)果顯示蟬蛻、防風(fēng)、雙花、茯苓可上調(diào)IL-2，蟬蛻、茯苓、