PTEN和P27在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)與意義.pdf

1、背景與目的
　　 食管癌是人類常見的惡性腫瘤，嚴(yán)重危害著人們的健康。其中約90％以上為鱗狀細(xì)胞癌。食管癌的發(fā)病率和死亡率有明顯的地區(qū)差異，中國(guó)為高發(fā)區(qū)，每年約有15萬(wàn)人死于食管癌。流行病學(xué)資料顯示膳食亞硝酸鹽含量增高、缺乏維生素以及食物霉菌污染等可能與食管癌發(fā)生有關(guān)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)食管癌的發(fā)生發(fā)展涉及到多個(gè)基因的改變，是癌基因的激活與抑癌基因失活長(zhǎng)期協(xié)同作用的結(jié)果。因此研究食管癌的發(fā)病機(jī)制，對(duì)其進(jìn)行預(yù)防和治療有著非常

2、重要的意義。
　　 PTEN(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten)，也稱MMAC1或TEP1，是1997年分別由三個(gè)研究小組定位克隆出一種新的抑癌基因，并從不同角度給出命名。PTEN通過(guò)去磷酸化參與細(xì)胞調(diào)控。PTEN編碼雙重底物特異性磷酸酶，具有蛋白磷酸酶活性和脂質(zhì)磷酸酶活性，是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的具有雙重特異性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN通過(guò)去除3，4，

3、5-三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)3位上的磷酸基團(tuán)；或使蛋白底物酸性蛋白多聚體脫磷酸，脫去多種促瘤生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的關(guān)鍵激酶的磷酸根，降低其磷酸化水平，以抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、粘附、轉(zhuǎn)化、鋪展及遷移，促進(jìn)凋亡，從而對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移具有負(fù)性調(diào)控作用。PTEN的缺失或突變可以導(dǎo)致功能的失活。PTEN失活影響腫瘤發(fā)展的不同階段，PTEN基因的九個(gè)外顯子上均可發(fā)生突變，其突變率與某些腫瘤惡性度明顯相關(guān)。
　　 細(xì)胞周期是細(xì)

4、胞生命活動(dòng)的基本過(guò)程。其調(diào)控有賴于細(xì)胞周期蛋白(cyclins)、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CKIs)、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)組成的立體網(wǎng)絡(luò)調(diào)控系統(tǒng)。這個(gè)系統(tǒng)中任何組分的異常表達(dá)，都可以導(dǎo)致細(xì)胞的惡性增殖。P27又稱激酶抑制蛋白1.是細(xì)胞周期依賴性激酶抑制物( cyclin dependent kinase inhibitors，CDKI)家族的重要成員，是一新近發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，它能與CDK結(jié)合并抑制其活性，進(jìn)而負(fù)性調(diào)控

5、細(xì)胞周期進(jìn)程，阻滯細(xì)胞周期G1由向S期轉(zhuǎn)換。是細(xì)胞周期的負(fù)性調(diào)控因子，P27的功能引起了廣泛的關(guān)注。
　　 目前國(guó)內(nèi)外對(duì)PTEN、P27mRNA在食管鱗癌中的表達(dá)情況和相關(guān)性研究尚未見報(bào)道，兩者之間與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展，浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系尚不十分清楚。為此，本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR方法檢測(cè)食管鱗癌與癌旁組織中PTEN和P27mRNA的表達(dá)情況，探討兩者之間腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用，并分析其之間的內(nèi)在聯(lián)系，以期為研究食管癌發(fā)生、發(fā)展

6、機(jī)理及臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 1.采集2009年1-6月份鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院胸外科接受手術(shù)治療的部分食管癌患者，標(biāo)本包括腫瘤組織60例及相應(yīng)癌旁正常食管組織60例。全部病例有完整的臨床資料及明確的病理診斷，且術(shù)前均未行化療或放療。
　　 2.應(yīng)用RT-PCR的方法檢測(cè)60例食管癌腫瘤組織及60例癌旁正常組織中PTEN、P27基因表達(dá)情況。并結(jié)合臨床病理特征，分析60例腫瘤組織中PTEN、

7、P27mRNA的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。
　　 3.應(yīng)用spss10.0版軟件包，采用t檢驗(yàn)、方差分析及Spearman相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1.癌組織中PTENmRNA的表達(dá)強(qiáng)度與癌旁正常組織表達(dá)的量分別為0.294±0.103和0.886±0.247(P＜0.05)。
　　 2.癌組織中P27mRNA的表達(dá)強(qiáng)度與癌旁正常組織表達(dá)的量分別為0.283±0

8、.127和0.894±0.336(P＜0.05)。
　　 3.PTENmRNA在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中的表達(dá)分別為0.223±0.101、0.559±0.364(P＜0.05)。PTENmRNA在高分化組、中分化組、低分化組的表達(dá)分別為0.508±0.225、0.339±0.137、0.117±0.031（P＜0.05）；且PTENmRNA的表達(dá)強(qiáng)度與食管癌的TNM分期有關(guān)，隨著分期越晚，PTEN

9、的表達(dá)越弱，Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期(P＜0.05)。PTENmRNA的表達(dá)與患者的性別、年齡之間無(wú)明顯差異。
　　 4.P27mRNA在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中的表達(dá)分別為0.319±0.117、0.624±0.265（P＜0.05）。P27mRNA在高分化組、中分化組、低分化組的表達(dá)分別為0.601±0.324、0.412±0.214、0.215±0.102（P＜0.05）；且P27mRNA的表達(dá)強(qiáng)度與

10、食管癌的TNM分期有關(guān)，隨著分期越晚，P27的表達(dá)越弱，Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期(P＜0.05)。P27mRNA的表達(dá)與患者的性別、年齡之間無(wú)明顯差異。
　　 5.Pearson相關(guān)性分析顯示，癌組織中PTENmRNA表達(dá)與P27mRNA表達(dá)之間呈正相關(guān)r=0.535(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.PTENmRNA在正常組織中呈現(xiàn)為高表達(dá)，在食管鱗狀細(xì)胞癌呈現(xiàn)低表達(dá)，與食管癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理分期