陜北蕎麥中類(lèi)黃酮的提取及純化工藝研究.pdf

1、本文以開(kāi)發(fā)利用蕎麥資源為主要目的，對(duì)我國(guó)陜北地區(qū)甜蕎麥(蕎麥殼、蕎麥仁、蕎麥莖)中的類(lèi)黃酮進(jìn)行提取和純化，并對(duì)其抗氧化性和對(duì)亞硝胺及其前體亞硝酸鹽的作用進(jìn)行了研究。初步探明了陜北蕎麥中類(lèi)黃酮的最佳提取、純化工藝，為工業(yè)化應(yīng)用提供相應(yīng)的工藝參數(shù)和科學(xué)依據(jù)。 1．以蕎麥類(lèi)黃酮得率為指標(biāo)，通過(guò)對(duì)乙醇浸提法、超聲波輔助提取法、超臨界CO<,2>流體萃取法的比較，得到蕎麥殼類(lèi)黃酮的最佳提取條件為：原料過(guò)40目篩，溫度70℃，在40％的乙醇

2、溶液中超聲提取70min，功率195W，料液比1：47(g：mL)；蕎麥仁類(lèi)黃酮的最佳提取條件為：原料過(guò)60目篩，溫度65℃，40％的乙醇溶液中超聲提取41min，功率160W，料液比為1：20(g：mL)；蕎麥莖類(lèi)黃酮的最佳提取條件為：原料過(guò)40目篩、70％的乙醇浸提2h，溫度75℃，料液比1：40(g：mL)。 2．為得到純度較高的蕎麥類(lèi)黃酮，以蕎麥類(lèi)黃酮的純度為指標(biāo)，比較了大孔吸附樹(shù)脂法和高速逆流色譜兩種純化方法，結(jié)果表明

3、采用高速逆流色譜法得到的類(lèi)黃酮純度較高。純化條件為：溶劑體系(正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水3：2：2：2 v/v)；上相為固定相；流速(2mL/min)；轉(zhuǎn)速(850r/min)；檢測(cè)波長(zhǎng)(280nm)。對(duì)經(jīng)高速逆流色譜純化的蕎麥殼類(lèi)黃酮產(chǎn)品進(jìn)行了鑒定：蕎麥殼產(chǎn)品中類(lèi)黃酮純度為88.7％，提高了2倍多。 大孔吸附樹(shù)脂純化方法，工藝簡(jiǎn)單，一次處理量大，樹(shù)脂再生容易。試驗(yàn)中比較了5種大孔樹(shù)脂的吸附性能，結(jié)果顯示AB-8大孔樹(shù)脂對(duì)蕎麥殼

4、和蕎麥仁中的類(lèi)黃酮吸附性及解吸性能最好。蕎麥殼類(lèi)黃酮的最佳純化條件為：吸附液濃度0.24mg/mL，上柱量8BV，吸附流速2.0mL/min，解吸液濃度40％，解吸流速1.0mL/min；蕎麥仁類(lèi)黃酮的最佳純化條件為：吸附液濃度0.32mg/mL，上柱量7BV，吸附流速2.0mL/min，解吸液濃度40％，解吸流速1.5mL/min；XDA-5大孔樹(shù)脂對(duì)蕎麥莖中的類(lèi)黃酮吸附性及解吸性能最好，最佳純化條件為：吸附液濃度0.16mg/mL，

5、上柱量11BV，吸附流速2.0mL/min，解吸液濃度80％，解吸流速1.0mL/min。 對(duì)大孔樹(shù)脂純化的產(chǎn)品進(jìn)行了鑒定：蕎麥殼類(lèi)黃酮產(chǎn)品的純度由27.9％提高到了59.5％；蕎麥仁類(lèi)黃酮產(chǎn)品的純度由15.2％提高到了32.7％；蕎麥莖類(lèi)黃酮產(chǎn)品的純度由15.3％提高到了54.8％。利用顏色反應(yīng)、紫外掃描、薄層層析、高效液相色譜對(duì)產(chǎn)品中的類(lèi)黃酮進(jìn)行了鑒定，證實(shí)了蘆丁的存在。 3．本文還初步研究了蕎麥類(lèi)黃酮物質(zhì)的功能性。

6、在抗氧化性評(píng)價(jià)試驗(yàn)中，在0.2mg/mL-1.0mg/mL的濃度范圍內(nèi)，蕎麥殼、莖、仁類(lèi)黃酮產(chǎn)品清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)的能力分別能達(dá)到80.5％，84.0％和42.9％，清除效果較好；對(duì)超氧陰離子自由基并未表現(xiàn)出較好的清除率，最高只有25.60％；在0.04-0.6mg/mL的濃度范圍內(nèi)，蕎麥類(lèi)黃酮對(duì)卵黃脂蛋白LPO的抑制率最高能達(dá)到49.8％。 在亞硝酸鹽的清除作用實(shí)驗(yàn)中，Ve和蕎麥殼類(lèi)黃酮產(chǎn)品的清除效果較好，

7、分別達(dá)到94.2％和63％，蕎麥仁和莖的類(lèi)黃酮產(chǎn)品只達(dá)到27.5％和21.6％，而蘆丁沒(méi)有清除作用。此外，三種養(yǎng)麥類(lèi)黃酮對(duì)亞硝胺的合成均有一定的阻斷作用，在0.5-2.5mg/mL的濃度范圍內(nèi)，蕎麥殼、仁、莖類(lèi)黃酮產(chǎn)品對(duì)亞硝胺合成的最高阻斷率分別能達(dá)到60.2％、46.7％和42.6％。蘆丁對(duì)亞硝胺的合成阻斷效果較好，在0.5mg/mL濃度時(shí)可達(dá)80.5％，Vc對(duì)亞硝胺的合成沒(méi)有阻斷作用。 本文首次對(duì)陜北蕎麥(蕎麥仁、蕎麥殼、蕎