tBHQ對顱腦創(chuàng)傷后炎癥反應保護作用的體外研究.pdf

1、目的:Nrf2通路在顱腦創(chuàng)傷后被激活，在顱腦創(chuàng)傷后具有極為重要的保護作用。動物實驗證實，tBHQ作為Nrf2的激活劑，可以抑制小鼠顱腦創(chuàng)傷后的炎癥反應，減輕繼發(fā)性腦損傷。本研究擬通過體外實驗，進一步探究tBHQ對顱腦創(chuàng)傷后炎癥反應的保護作用及可能機制。
　　方法:ICR胎鼠培養(yǎng)原代神經(jīng)元細胞，待細胞成熟后，分為三組:(1)對照組;(2)TBI組;(3)TBI+tBHQ組。每組18孔細胞。處理結(jié)束24h后Western-Blot技術(shù)

2、觀察Nrf2胞漿/核含量，EMSA技術(shù)研究核內(nèi)Nrf2的DNA結(jié)合活性、NF-κB的DNA結(jié)合活性;Real-timePCR技術(shù)定量測定Nrf2-ARE通路下游因子NQO1、HO-1、GST、γGCS的mRNA表達水平;化學發(fā)光法檢測細胞上清GSH、GSSG含量;熒光發(fā)光法檢測細胞上清ROS水平。
　　結(jié)果:TBI后細胞核內(nèi)Nrf2及下游因子NQO1、HO-1、GST、γGCS表達增加，tBHQ可進一步增加其表達水平(P＜0.05