槲皮素及其單糖苷異槲皮素，雙糖苷蘆丁抗自由基構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、目的:采用不同氧自由基損傷模型對(duì)槲皮素(Quercetin，Q)及其單糖苷異槲皮素(Isoquercetin，I)和雙糖苷蘆丁(Rutin，R)的抗自由基作用進(jìn)行比較性研究，進(jìn)而對(duì)其構(gòu)效關(guān)系予以探討。 方法1.Q，I，R體外清除氧自由基作用采用H2O2/Fe2+體系，通過Fenton反應(yīng)生成羥自由基(·OH)；鄰苯三酚自氧化法，產(chǎn)生超氧陰離子(O2·-)；通過上述Fenton反應(yīng)生成·OH，進(jìn)而造成小鼠肝勻漿細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化以及

2、紅細(xì)胞(RBC)液中RBC損傷性破裂。根據(jù)UV-754分光光度計(jì)所測(cè)光密度數(shù)值計(jì)算三種黃酮類藥物在四種不同濃度時(shí)的自由基清除率和抑制率，并根據(jù)清除率及抑制率計(jì)算各黃酮類化合物的SC50以及IC50。 2.Q，I，R對(duì)體外細(xì)胞自由基損傷模型的保護(hù)作用分別利用過氧化氫(H2O2)和缺氧缺糖培養(yǎng)液對(duì)人胚腎細(xì)胞(HEK293)造成損傷。采用MTT法，觀察不同處理后細(xì)胞存活率變化，測(cè)定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活力及細(xì)胞培養(yǎng)液上清乳酸

3、脫氫酶(LDH)含量，總抗氧化能力(TAC)，在細(xì)胞水平觀察三種化合物的清除自由基作用。 3.Q，I，R對(duì)腦、肝自由基損傷模型的保護(hù)作用通過雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎造成小鼠持久性腦缺血模型，應(yīng)用CCl4腹腔注射造成小鼠肝臟自由基損傷模型。測(cè)定小鼠腦勻漿SOD活力以及丙二醛(MDA)含量以及各組小鼠平均存活時(shí)間以觀察腦缺血對(duì)小鼠的損傷及三種化合物的保護(hù)作用。通過測(cè)定小鼠肝勻漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)以及MDA含量，觀察CCl4對(duì)小鼠肝臟的損害

4、以及三種化合物的保護(hù)作用。 結(jié)論1.三種黃酮類化合物均有極強(qiáng)的抗自由基活性；在體外純化學(xué)反應(yīng)體系(·OH實(shí)驗(yàn)，O2·-實(shí)驗(yàn))中，R＞I＞Q；體外生物體系(小鼠肝勻漿膜脂質(zhì)過氧化損傷實(shí)驗(yàn)，兔RBC膜破裂實(shí)驗(yàn))中，其順序正好相反，為Q＞I＞R。 2.三種黃酮類化合物對(duì)體外細(xì)胞培養(yǎng)中H2O2及缺氧缺糖產(chǎn)生的自由基有顯著清除作用，對(duì)損傷細(xì)胞具有保護(hù)作用。其作用強(qiáng)度為Q＞I＞R。 3.三種黃酮類化合物對(duì)腦缺血誘發(fā)小鼠腦自由