纈沙坦對(duì)阿霉素心臟毒性預(yù)保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：探討預(yù)防性應(yīng)用纈沙坦對(duì)阿霉素心臟毒性預(yù)防作用及可能機(jī)制。
　　方法：1）動(dòng)物模型建立及分組處理：61只8周齡清潔級(jí)SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為四組：正常對(duì)照組（n=10）；模型組（n=17）：腹腔注射阿霉素，2.5mg/kg，共6周，累積計(jì)量15mg/kg；纈沙坦低劑量干預(yù)組（n=17）與纈沙坦（高劑量）干預(yù)組（n=17）。纈沙坦干預(yù)組，阿霉素處理同模型組，在阿霉素第一次給藥的同時(shí)，分別給予纈沙坦10mg/kg（低劑量）和3

2、0mg/kg（高劑量），每日灌胃1次，用藥時(shí)間同阿霉素。2）指標(biāo)檢測：用藥6周后，觀察4周，心臟超聲檢測大鼠左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室短軸縮短率（LVFS）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESD）、左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)。超聲完成后取出心臟進(jìn)行HE、天狼猩紅染色。觀察心肌細(xì)胞形態(tài)變化，計(jì)算心肌膠原容積分?jǐn)?shù)（CVF）。ELISA法檢測腎素、血管緊張素Ⅱ、醛固酮含量、活性氧（ROS）含量。用qRT-PCR檢測心肌組織中NOX1、NOX4

3、、膠原Ⅰ、膠原Ⅲ、腎素、血管緊張素Ⅱ基因表達(dá)。免疫組化檢測心肌膠原I和膠原Ⅲ蛋白表達(dá)。應(yīng)用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：1、大鼠一般狀況：正常對(duì)照組：大鼠被毛光滑，活潑，飲食正常，實(shí)驗(yàn)第10周末無死亡。模型組大鼠在用藥過程中逐漸出現(xiàn)食欲不振、體重下降、腹水等癥狀，至10周末死亡8只，生存率為52.9％纈沙坦高劑量干預(yù)組一般狀況與正常對(duì)照組類似，但偶有大鼠發(fā)生腹瀉及出血癥狀，飼養(yǎng)至第10周末，死亡6只，生存率為64.7

4、%。纈沙坦低劑量干預(yù)組一般狀況介于正常對(duì)照組和模型組之間，至第10周末死亡6只，生存率為64.7%。
　　2、心臟彩超檢查：（1）實(shí)驗(yàn)第10周模型組大鼠心腔擴(kuò)大，室壁活動(dòng)減弱，LVESD模型組為（3.9±0.5）mm均大于纈沙坦高劑量干預(yù)組（2.4±0.6）mm、正常對(duì)照組（2.4±0.8）mm，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與纈沙坦低劑量干預(yù)組（3.2±0.9） mm相比，模型組 LVESD數(shù)值雖然增大，但差異無顯著性（P＞

5、0.05）。（2）模型組大鼠左心室收縮功能減低，LVEF模型組為（57.0±1.9）%，顯著低于纈沙坦低劑量干預(yù)組（75.5±6.9）%、正常對(duì)照組（91.6±4.4）%及纈沙坦高劑量干預(yù)組（87.4±5.8）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。低劑量干預(yù)組LVEF（75.5±6.9）%較模型組（57.0±1.9）%雖有提高，但與正常對(duì)照組（91.6±4.4）%相比，仍有較大差距，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、病理

6、染色：（1）HE染色：正常對(duì)照組：心肌纖維排列整齊，染色均勻，無斷裂及扭曲，細(xì)胞間質(zhì)無水腫。模型組：心肌纖維排列紊亂，部分纖維斷裂，細(xì)胞間質(zhì)腫脹。纈沙坦低劑量干預(yù)組：鏡下觀介于模型組與正常對(duì)照組之間類似。纈沙坦高劑量干預(yù)組：與正常對(duì)照組類似。心肌纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰，排列整齊。（2）天狼猩紅染色：正常對(duì)照組：鏡下心肌膠原排列有序，可見少量著染為猩紅色的膠原纖維分布于細(xì)胞間質(zhì)，血管周圍可見較多膠原纖維，CVF為（3.16±0.51）%。模型組

7、：心肌纖維結(jié)構(gòu)紊亂，大量猩紅色膠原纖維分布在血管周圍、心肌纖維間質(zhì)，與心肌纖維交錯(cuò)排列，CVF為（15.24±1.28）%。纈沙坦低劑量干預(yù)組：膠原纖維較正常組多，但較模型組少，CVF為（8.32±1.06）%。纈沙坦高劑量干預(yù)組：可見少量散在猩紅色心肌膠原纖維分布在心肌細(xì)胞間質(zhì)，血管周圍膠原纖維量較多，CVF為（4.23±0.43）%。
　　4.腎素、血管緊張素Ⅱ、醛固酮、ROS含量：相對(duì)于正常組，模型組大鼠心肌組織內(nèi)腎素、血管

8、緊張素Ⅱ、醛固酮含量增加，ROS濃度升高。纈沙坦干預(yù)組心肌組織內(nèi)腎素、血管緊張素Ⅱ、醛固酮、ROS含量較模型組均減低，低劑量干預(yù)組與模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），高劑量干預(yù)組與模型對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　5．腎素、血管緊張素Ⅱ、NOX1、NOX4、膠原Ⅰ和膠原ⅢmRNA表達(dá)：模型與正常對(duì)照組相比，腎素、血管緊張素Ⅱ、NOX1、NOX4、膠原Ⅰ和膠原Ⅲ呈現(xiàn)過表達(dá)。提示在模型組 RAAS激活，心肌

9、膠原表達(dá)增加。而上述指標(biāo)纈沙坦低劑量干預(yù)組、纈沙坦高劑量干預(yù)組與模型組相比表達(dá)下調(diào)。
　　6、免疫組化檢測膠原Ⅰ和膠原Ⅲ蛋白表達(dá)：模型組大鼠心肌膠原Ⅰ、膠原Ⅲ蛋白表達(dá)較正常組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），纈沙坦低劑量干預(yù)組膠原Ⅰ、膠原Ⅲ蛋白表達(dá)較模型組有所減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），纈沙坦高劑量干預(yù)組膠原Ⅰ、膠原Ⅲ蛋白表達(dá)教模型組明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），較正常對(duì)照組表達(dá)稍高，但差異無