蒸發(fā)光散射檢測器在復雜中藥檢測中的應用及與毛細管分離系統(tǒng)聯(lián)用的研究.pdf

1、隨著中藥現(xiàn)代化研究的不斷深入,對分離分析技術的要求逐步升級,對分析檢測方法的多樣性與先進性也提出了巨大挑戰(zhàn)。單種中藥所含化學成分可能有百余種,并且隨著研究的發(fā)展還可能不斷有新的化學成分被發(fā)現(xiàn)。對于中藥復方,在炮制煎煮過程中還可能產(chǎn)生出新的成分,因此中藥的質量控制是非常復雜的問題。蒸發(fā)光散射檢測器(Evaporative light scattering detector, ELSD)作為一款通用的檢測器,可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品

2、,具有廣泛的梯度和溶劑兼容性,尤其在植物藥質量控制、食品安全等領域更具優(yōu)勢。目前,世界上植物藥,或者稱為更廣泛意義上的天然藥物的復興方興未艾,是全球“綠色”浪潮的組成部分。銀杏葉片藥物在國際上廣泛使用,它是現(xiàn)代植物藥的典型代表,也是第一個現(xiàn)代植物藥,標志著現(xiàn)代植物藥的開始。鑒于紫外(UV)檢測手段也屬高度靈敏的檢測手段之一,本研究的一部分即將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測的通用互補結合,搭建了新型的雙檢測器平臺,對復雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及

3、其中重要組分萜類內酯進行分離分析鑒定,并在此基礎上發(fā)展了雙重指紋圖譜的解析方法。另一方面,儀器微型化已成為當前分析儀器及方法的一個重要發(fā)展方向,在生物醫(yī)學、高通量藥物合成篩選等方面有著廣闊的前景。本研究初步考察了微型化噴霧方式。將微流蒸發(fā)光散射檢測器與毛細管分離系統(tǒng)聯(lián)用,進行復雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其分散片制劑、其中萜類內酯與黃酮類物質的分離檢測。這種方法擴大了毛細管液相色譜(cLC)、加壓毛細管電色譜(pCEC)的應用范圍,使微流蒸

4、發(fā)光散射檢測器與毛細管分離系統(tǒng)的聯(lián)用成為解決復雜樣品分離分析強有力的工具。本研究分為五個部分：
　　第一章綜述了蒸發(fā)光散射檢測器的基本原理、檢測步驟及應用優(yōu)勢。同時介紹了復雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物、中藥指紋圖譜質量控制的相關背景。此外總結了毛細管分離系統(tǒng)及相關檢測器聯(lián)用研究,并詳述了與蒸發(fā)光散射檢測器相近檢測原理的另一種光散射檢測器-冷凝光散射檢測器與毛細管分離體系聯(lián)用的研究進展。
　　第二章搭建了HPLC-UV-ELSD雙重

5、檢測器平臺,將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測的通用互補結合,對復雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其中重要組分萜類內酯(銀杏內酯A、銀杏內酯B、銀杏內酯C及白果內酯)進行分離分析鑒定。優(yōu)化溶劑提取條件為70/30(v/v)甲醇/水,體系超聲60 min;優(yōu)化色譜條件為:溶劑A(0.05％aqueous TFA)與溶劑B(異丙醇),梯度條件:5-20%溶劑B,0-50 min,保持20%B至80 min。
　　第三章研究嘗試了一種有效、成功的雙重

6、指紋圖譜分析方法。首先有效分離全國十產(chǎn)地(陜西、北京、山東、浙江、廣東、江蘇、天津、湖南)銀杏葉提取物。其次采用中藥色譜指紋分析相似度評價系統(tǒng)對次十個產(chǎn)地來源的藥材進行相似度分析,分別建立UV與ELSD檢測器各自的對照指紋圖譜。采用SPSS軟件進行主成分分析與聚類分析,采用可視化與直觀的3D曲線圖表征各產(chǎn)地藥材區(qū)別信息。最后合并單個檢測指紋圖譜進行分析,為復雜中藥銀杏葉提取物的質量控制提供了一種更全面的信息獲取方式。
　　第四章分

7、別初步考察了微型化噴霧方式中的電噴霧與氣動噴霧方式。搭建離線電噴霧平臺,通過考察不同噴霧管材質、10種噴針位置、6種噴針內徑、5種電極模式,對離線噴霧距離進行表征,為電噴霧方式在微型化ELSD微型化中的應用做了鋪墊。此外采用最新研制的微流蒸發(fā)光散射檢測器,通過縮小不銹鋼套管與毛細管噴針的間隙由40μm至25μm,有效減小載氣流量至1 L/min以下,且樣品響應信噪比得到提高。通過提高漂移管溫度與載氣流量,增大有機相比例,可提高信噪比,減