原發(fā)性肝癌來源于骨髓源性細(xì)胞的探索.pdf

1、背景:近年的大量研究證實(shí):骨髓源性干細(xì)胞具有肝細(xì)胞分化潛能,能定植于肝臟,參與受損肝臟的再生和修復(fù).2004年Houghton等在《SCIENCE》上報(bào)道Hp誘發(fā)的胃癌可能來源于骨髓源性干細(xì)胞.這些結(jié)果提示:原發(fā)性肝癌也可能來源于骨髓源性干細(xì)胞.本研究在創(chuàng)建相關(guān)動物模型的基礎(chǔ)上,探索骨髓源性細(xì)胞在原發(fā)性肝癌形成中的作用. 第一部分:C57BL/6J小鼠同基因骨髓移植模型的研究 一、目的:研究c57BL/6J小鼠全骨髓毀損

2、最適輻照劑量. 方法:觀察不同劑量輻照(8.0 Gy,9.0 Gy,10.0 Gy;11.0 Gy)的c57BL/6J小鼠行或未行骨髓移植后的生存率差異. 結(jié)論:9.0 Gy是c57BL/6J小鼠骨髓毀損的最適照射劑量. 二、目的:研究9.0 Gy輻照小鼠同基因骨髓移植后骨髓功能的重建規(guī)律. 方法:動態(tài)檢測9.0 Gy輻照小鼠骨髓移植后的外周血像. 結(jié)論:9.0 G

3、y輻照小鼠骨髓移植后5周骨髓功能完全重建;白細(xì)胞數(shù)是檢測骨髓功能重建的良好指標(biāo). 三、目的:研究9.0Gy輻照后的c57BL/6J小鼠骨髓毀損程度. 方法:c57BL/6J小鼠9.0 Gy輻照后,接受Rosa26小鼠的骨髓移植,檢測骨髓重建后外周血白細(xì)胞中β-gal陽性細(xì)胞情況. 結(jié)論:9.0 Gy是理想的骨髓毀損輻照劑量. 四、目的:評價(jià)球后注射法骨髓移植在C57BL/6J小鼠中的應(yīng)用價(jià)

4、值. 方法:C57BL/6J小鼠9.0 Gy輻照后,行球后注射法或尾靜脈注射法骨髓移植;比較兩種移植方法間存在的差異. 結(jié)論:球后注射法骨髓移植是可行的,在操作上較尾靜脈注射法省時(shí)、穩(wěn)定,是C57BL/6J小鼠骨髓移植的首選方法. 第二部分: C57BL/6J小鼠誘發(fā)性肝癌模型的建立 一、目的:建立C57BL/6J小鼠誘發(fā)性肝癌模型 方法:C57BL/6J 小鼠接受低劑量輻

5、照 (2Gy) 后分別以二乙基亞硝胺(DEN)和2-乙酰氨基芴(AAF)誘癌,MRI監(jiān)測肝癌發(fā)生情況. 結(jié)論:輻照聯(lián)合DEN或AAF能有效誘發(fā)C57BL/6J小鼠肝癌形成;MRI是小鼠誘癌過程中一種有效的監(jiān)測手段. 二、目的:觀察C57BL/6J小鼠肝癌誘發(fā)過程中的病理形態(tài)演變特點(diǎn). 方法:在DEN和AAF誘癌過程中,定期取肝臟行常規(guī)病理觀察. 結(jié)論:C57BL/6J小鼠誘發(fā)性肝癌

6、模型可作為研究人類肝癌的一種可供選擇的動物模型. 第三部分:原發(fā)性肝癌來源于骨髓源性細(xì)胞的探索 目的:探索原發(fā)性肝癌是否來源于骨髓源性細(xì)胞 方法:C57BL/6J雌性小鼠致死性射線照射后接受來自C57BL/6J雄性小鼠的骨髓移植,5周后選康復(fù)小鼠予DEN誘癌.30周后處死小鼠獲取肝癌標(biāo)本,Y染色體熒光原位雜交和SRY基因PCR檢測肝癌中Y染色體存在情況. 結(jié)論:原發(fā)性肝癌可來源于骨髓源性細(xì)胞,其相關(guān)機(jī)制仍