STIM1在下咽癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　鈣離子輸入（SOCE）作為維持細(xì)胞內(nèi)Ca2+平衡的重要途徑在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用。STIM1是SOCE的重要組成部分，在細(xì)胞內(nèi)起到Ca2+感受器和SOCE激發(fā)器的雙重作用。研究表明STIM1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，但它在下咽癌中的功能還尚未知曉。本文通過(guò)慢病毒感染沉默人下咽癌細(xì)胞系Fadu細(xì)胞中的STIM1基因，來(lái)深入研究STIM1對(duì)下咽癌的影響。
　　方法：
　　利用Real time PCR和

2、免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)下咽癌細(xì)胞和組織中STIM1的表達(dá)水平。對(duì)處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期的Fadu細(xì)胞進(jìn)行慢病毒感染，STIM1-siRNA沉默的Fadu細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組；陰性慢病毒對(duì)照感染的Fadu細(xì)胞作為對(duì)照組。利用Real time PCR和Western blot檢測(cè)慢病毒感染效率。利用BrdU實(shí)驗(yàn)、FACS法、PI-FACS法、克隆方法、Cellomics法分別檢測(cè)STIM1對(duì)Fadu細(xì)胞的增殖、凋亡、周期克隆能力、增殖活性等方面的影響。

3、
　　結(jié)果：
　　1.STIM1在下咽癌細(xì)胞和組織中均顯著高表達(dá)，p<0.05；
　　2.慢病毒成功感染Fadu并使STIM1沉默，p<0.05；
　　3.STIM1沉默后，F(xiàn)adu細(xì)胞的增殖受到抑制、凋亡率明顯增加、G1期下的細(xì)胞數(shù)量明顯增多、G2/M期下的細(xì)胞數(shù)量明顯減少、克隆能力減弱并且其增殖活性受到明顯抑制，p<0.05。
　　結(jié)論：
　　STIM1在被沉默后Fadu細(xì)胞的癌活性受到抑制，提示